[發明專利]一種以多花黃精莖節培育組培苗的方法

在審

• 申請號: 202110854427.8
• 申請日: 2021-07-28
• 公開（公告）號: CN113412788A
• 公開（公告）日: 2021-09-21
• 發明（設計）人: 石云平;許娟;覃永嬡;蘇祖祥;李小泉
• 申請（專利權）人: 廣西壯族自治區農業科學院
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 桂林市華杰專利商標事務所有限責任公司 45112
• 代理人: 楊雪梅

1.一種以多花黃精莖節培育組培苗的方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）外植體取材及預處理：

取多花黃精幼嫩的莖芽，剪掉葉片，用洗衣粉水浸泡，不時攪拌，再用流動清水沖洗干凈，濾干水滴，備用；

（2）滅菌及初代誘導培養：

在超凈工作臺上，將多花黃精莖剪成帶節間1 cm長的莖段，用0.1%升汞溶液滅菌處理，無菌水清洗干凈，放到滅菌過的濾紙上吸干水分，剪去兩頭的舊傷口，接入初代誘導培養基上培養30 天，芽誘導率為62.1%～95.80%；

所述初代誘導培養基為：MS+6-BA0.5～2.0mg/L+ZT0.1～0.7mg/L+TDZ0.1～0.5 mg/L+IAA0.01～0.1 mg/L+谷氨酰胺0.2 mg/L+白糖30 g/L+瓊脂5 g/L，pH值為5.8；

（3）繼代增殖培養：

在超凈工作臺上，將步驟（2）中誘導出的無菌芽剪成帶節間的莖段，接入增殖培養基中培養30 天，莖段誘導出叢生芽中部分為單葉芽、部分為有莖葉的芽，增殖系數為3.2～5.9；

所述增殖培養基為：MS+ZT0.1～0.5mg/L+6-BA0.5～2.0 mg/L+NAA0.01～0.1mg/L+2,4-D 0.1～0.5 mg/L+白糖30 g/L+瓊脂5 g/L，pH值為5.8；

（4）壯芽培養：

在超凈工作臺上，取出步驟（3）中叢生芽，切分成有2個芽的小叢生芽，接入壯芽培養基中培養30 天，單葉芽長成帶莖葉的芽，芽比較壯，芽高為2～5 cm；

所述壯芽培養基為：MS+6-BA0.5～2.0 mg/L+KT0.1～1.0mg/L + NAA0.05～0.5 mg/L+白糖30 g/L+瓊脂5 g/L，pH值為5.8；

（5）生根結塊莖培養：

將步驟（4）中得到帶莖葉的叢生芽切分成單芽，接入生根結塊莖培養基中培養60天，獲得有塊莖的組培苗，塊莖大小為0.4～1.2 cm，平均根數為5.4～24.1條；

所述生根結塊莖培養基為：1/2MS+NAA0.5～2.0mg/L+IAA0.5～2.0 mg/L+DA-6 0.1～0.5 mg/L+白糖35 g/L+瓊脂5 g/L，pH值為5.8；

步驟（2）至（5）的培養條件是：培養溫度為25±1℃, 光照時間為12小時/天，光照強度為2000 Lx。

2.根據權利要求1所述的以多花黃精莖節培育組培苗的方法，其特征在于：

步驟（2）所述初代誘導培養基為：MS+6-BA1.0mg/L+ZT0.4mg/L + TDZ0.3mg/L +IAA0.05 mg/L+谷氨酰胺0.2 mg/L +白糖30 g/L+瓊脂5 g/L，pH值為5.8。

3.根據權利要求1所述的以多花黃精莖節培育組培苗的方法，其特征在于：

步驟（3）所述增殖培養基為：MS+ZT0.3mg/L+6-BA1.0 mg/L+NAA0.05 mg/L+2,4-D0.3mg/L +白糖30 g/L+瓊脂5 g/L，pH值為5.8。

4.根據權利要求1所述的以多花黃精莖節培育組培苗的方法，其特征在于：

步驟（4）所述壯芽培養基為：MS+6-BA1.0 mg/L+KT0.5mg/L + NAA0.2 mg/L+白糖30 g/L+瓊脂5 g/L，pH值為5.8。

5.根據權利要求1所述的以多花黃精莖節培育組培苗的方法，其特征在于：

步驟（5）所述生根結塊莖培養基為：1/2MS+NAA1.0 mg/L+IAA1.0 mg/L+DA-6 0.2 mg/L+白糖35 g/L+瓊脂5 g/L，pH值為5.8。