[發明專利]氈毛青霉DZ-9-67及其在杜仲葉總黃酮提取中的應用

有效

• 申請號: 202110844947.0
• 申請日: 2021-07-26
• 公開（公告）號: CN113564055B
• 公開（公告）日: 2023-09-01
• 發明（設計）人: 陳虹;張建芬;柯薇;陸胤
• 申請（專利權）人: 浙江樹人學院（浙江樹人大學）
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12N3/00;A61K36/46;C12R1/80
• 代理公司: 杭州天正專利事務所有限公司 33201
• 代理人: 黃美娟;李世玉

1.氈毛青霉(Penicillium?velutinum)DZ-9-67，保藏于廣東省微生物菌種保藏中心，保藏編號：GDMCC?No:61728，保藏日期2021年6月21日，地址：廣東省廣州市先烈中路100號大院59號樓5樓；郵編510070。

2.一種權利要求1所述氈毛青霉DZ-9-67在杜仲葉總黃酮提取中的應用。

3.如權利要求2所述的應用，其特征在于所述應用的方法為：杜仲葉粉中加入無菌蔗糖水溶液，接種氈毛青霉DZ-9-67孢子，于28–30℃發酵2–3d，發酵物加入乙醇水溶液中浸提后再進行超聲提取，抽濾，濾液濃縮后，獲得濃縮物，真空干燥，獲得杜仲葉總黃酮粗提物。

4.如權利要求3所述的應用，其特征在于所述的無菌蔗糖水溶液濃度為3–5g/L，無菌蔗糖水溶液體積用量以杜仲葉粉重量計為1.0–1.5mL/g，所述氈毛青霉DZ-9-67孢子接種量以杜仲葉粉重量計為5×10⁷–7×10⁷個/g。

5.如權利要求3所述的應用，其特征在于所述杜仲葉粉是將成熟的綠色杜仲葉烘干粉碎后過20目篩獲得。

6.如權利要求3所述的應用，其特征在于所述乙醇水溶液體積濃度50％–70％，所述乙醇水溶液用量以發酵前杜仲葉粉重量計為15–25mL/g。

7.如權利要求3所述的應用，其特征在于所述超聲提取是在50℃的超聲波清洗機中，200–300W超聲提取30–60min。

8.如權利要求3所述的應用，其特征在于所述氈毛青霉DZ-9-67孢子以孢子液的形式加入，所述孢子液的制備方法為：低溫保藏的氈毛青霉DZ-9-67接種于PDA平板培養基，于28–30℃恒溫培養1.5–2d后，加入無菌生理鹽水于培養皿中，用接種環攪動使孢子懸浮，獲得孢子液；所述的PDA平板培養基終濃度組成為：馬鈴薯200g/L，葡萄糖20g/L，瓊脂20g/L，溶劑為自來水，pH自然。

9.如權利要求3所述的應用，其特征在于所述濃縮物的制備方法為：發酵物加入體積濃度50％–70％乙醇水溶液中，攪拌均勻后置于60–70℃水浴中浸提2–4h，然后轉入50℃的超聲波清洗機中，200–300W超聲提取30–60min；超聲醇提結束后，趁熱抽濾，將濾液45℃減壓濃縮至原體積的1/15–1/25，獲得濃縮物；所述乙醇水溶液用量以發酵前杜仲葉粉重量計為15–25mL/g。

10.如權利要求3所述的應用，其特征在于所述真空干燥為：50℃、0.1MPa條件下真空干燥至恒重。