[發(fā)明專利]一種小鼠早衰模型及其構建方法與應用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202110842679.9
• 申請日: 2021-07-26
• 公開（公告）號: CN113528572B
• 公開（公告）日: 2023-06-20
• 發(fā)明（設計）人: 史麗云;張薇;沙舟;冀鵬
• 申請（專利權）人: 浙江樹人學院（浙江樹人大學）
• 主分類號: C12N15/85
• 分類號: C12N15/85;A01K67/027
• 代理公司: 江蘇圣典律師事務所 32237
• 代理人: 仲凌霞;肖明芳

本發(fā)明公開了一種小鼠早衰模型及其構建方法與應用，所述小鼠早衰模型是通過敲除小鼠骨髓來源細胞中的乙肝病毒X蛋白結合蛋白而獲得的。該早衰小鼠在4?8個月齡時出現(xiàn)脫毛、衰老相關基因表達顯著上調、血清中衰老相關的分泌表型因子上調、組織器官衰老等典型的早衰表型。本發(fā)明通過操控骨髓來源的免疫細胞條件性敲除HBXIP，誘導小鼠早衰具有顯著的創(chuàng)新性和良好的應用前景，可用于建立延緩衰老的個性化藥物/食材/技術方法等的篩選平臺，同時，可用于研究衰老相關疾病，如神經退行性疾病、代謝性疾病、自身免疫及炎癥性疾病等發(fā)病機制研究，以及相關疾病的預防、診斷和治療等技術和產品研發(fā)。

技術領域

本發(fā)明涉及生物技術領域中，具體涉及一種小鼠早衰模型及其構建方法與應用。

背景技術

早衰即過早衰老，是指由于各種內在的或外在的原因使機體過早地出現(xiàn)生理上、體質上和心理上衰弱的現(xiàn)象，且其病理機制尚未明確。因此，衰老相關疾病已成為全球科研領域亟需解決和突破的熱點及難點，延緩衰老是保證社會穩(wěn)定、經濟持續(xù)性發(fā)展的必要條件。

利用小鼠等模式生物衰老模型能更好地認識人類衰老的進程，為臨床轉化研究提供有效的工具和理論基礎。常見的小鼠衰老模型主要包括D-半乳糖小鼠衰老模型、γ射線照射誘導小鼠衰老模型、胸腺摘除誘導小鼠衰老模型。除自然衰老小鼠模型以外，目前常見的小鼠衰老模型主要包括D-半乳糖注射小鼠衰老模型、胸腺摘除誘導小鼠衰老模型、γ射線照射誘導小鼠衰老模型等，這三種常見的小鼠衰老模型的構建方法及存在的缺陷如下所述：1)D-半乳糖注射法小鼠衰老模型：小鼠腹腔注射D-半乳糖生理鹽水溶液500毫克/千克/天，連續(xù)2個月成模。每天注射D-半乳糖比較繁瑣，注射造模時間較長，需要2個月左右，且由于小鼠的個性差異較大，不易控制；2)胸腺摘除小鼠衰老模型：麻醉小鼠，剝離并取出胸腺，縫合切口并滴加青霉素，繼續(xù)常規(guī)飼養(yǎng)6個月成模。該造模方法對試驗技術要求較高，在摘除胸腺時容易導致小鼠死亡，有一定的差異性。其耗費時間更長，需要6個月。胸腺摘除小鼠，對于衰老的某些免疫指標無法進行定性或定量的測定，難以判斷是否達到理想的衰老狀態(tài)，影響模型的可信度；3)γ射線照射誘導小鼠衰老模型：小鼠給予3Gy全身照射(照射面積為25cm×25cm，高度為80cm，時間為5min)，每10天一次，共8次，總計24Gy，80天后成模型。但是如果輻射劑量過大，則會使試驗動物容易死亡，無法進行試驗，因此要掌握好輻射的度和時間。

乙肝病毒X蛋白結合蛋白(hepatitis?B?X-interacting?protein,HBXIP)，是一種主要存在于哺乳動物的細胞組成型蛋白，分子量約為19kDa。HBXIP能夠抑制乙型肝炎病毒的復制，促進腫瘤細胞的增殖和遷移，抑制LPS誘導的急性肺損傷和內毒素血癥等。研究表明HBXIP促進細胞周期蛋白上調，抑制細胞周期負調控因子p21、p27表達，從而促進細胞增殖。HBXIP通過MDM2促進腫瘤抑制因子p53的降解，加速乳腺癌的生長。此外，HBXIP是晚期內體/溶酶體適配器以及MAPK和哺乳動物雷帕霉素靶蛋白LAMTOR復合物的成員之一，參與調控mTORC1的活化，影響細胞的合成代謝、翻譯、轉錄、脂質合成、自噬等過程。因此，HBXIP是參與機體重要生命活動的調節(jié)因子。本發(fā)明提供了一種基于HBXIP條件敲除的小鼠早衰模型構建及相關應用。

發(fā)明內容

發(fā)明目的：本發(fā)明所要解決的技術問題是針對現(xiàn)有技術的不足，提供一種小鼠早衰模型。

本發(fā)明還要解決的技術問題是提供上述小鼠早衰模型的構建方法。

本發(fā)明最后要解決的技術問題是提供上述小鼠早衰模型的應用。

為了解決上述第一個技術問題，本發(fā)明公開了一種小鼠早衰模型，其特征在于，敲除小鼠骨髓來源細胞中的乙肝病毒X蛋白結合蛋白(HBXIP)。

其中，所述敲除為敲除乙肝病毒X蛋白結合蛋白編碼基因中的第二個外顯子。