[發(fā)明專利]一種小鼠早衰模型及其構(gòu)建方法與應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110842679.9
• 申請(qǐng)日: 2021-07-26
• 公開（公告）號(hào): CN113528572B
• 公開（公告）日: 2023-06-20
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 史麗云;張薇;沙舟;冀鵬
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 浙江樹人學(xué)院（浙江樹人大學(xué)）
• 主分類號(hào): C12N15/85
• 分類號(hào): C12N15/85;A01K67/027
• 代理公司: 江蘇圣典律師事務(wù)所 32237
• 代理人: 仲凌霞;肖明芳

1.一種小鼠早衰模型的應(yīng)用，其特征在于，所述小鼠早衰模型為通過Cre-loxp系統(tǒng)敲除小鼠骨髓來源細(xì)胞中的乙肝病毒X蛋白結(jié)合蛋白編碼基因中的第二個(gè)外顯子；所述乙肝病毒X蛋白HBXIP結(jié)合蛋白編碼基因的mRNA序列為GenBank中的Accession:?NM_026774.2，其基因組序列為GenBank中的Accession:?NC_000069.7；所述應(yīng)用為所述小鼠早衰模型在開發(fā)或篩選預(yù)防和/或治療早衰產(chǎn)品中的應(yīng)用，或所述小鼠早衰模型在開發(fā)或篩選預(yù)防和/或治療早衰技術(shù)方法中的應(yīng)用；所述Cre-loxp系統(tǒng)敲除中運(yùn)用Optimized?Cas9/CRISPRSystem技術(shù)，將核苷酸序列如SEQ?ID?No.3所示的gRNA-1，核苷酸序列如SEQ?ID?No.4所示的gRNA-2，核苷酸序列如SEQ?ID?No.5所示的SSODN同源重組模板導(dǎo)入小鼠受精卵中獲得HBXIP^fl/+小鼠；將HBXIP^fl/+小鼠與HBXIP^fl/+小鼠交配，獲得HBXIP^fl/fl純合子小鼠；將HBXIP^fl/fl小鼠與LysM^cre/+小鼠交配，獲得HBXIP^fl/+-LysM^cre/+小鼠；將HBXIP^fl/+-LysM^cre/+小鼠與HBXIP^fl/+-LysM^cre/+小鼠交配，獲得HBXIP^fl/fl-?LysM^cre/+小鼠。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述小鼠早衰模型的應(yīng)用，其特征在于，所述敲除為通過骨髓細(xì)胞特異性表達(dá)Cre重組酶小鼠LysM^cre/+敲除。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述小鼠早衰模型的應(yīng)用，其特征在于，步驟（1）中，所述HBXIP^fl/+小鼠為將C57BL/6小鼠中乙肝病毒X蛋白結(jié)合蛋白基因組序列的第762位核苷酸后插入如SEQID?No.1所示的核苷酸序列，第1250位核苷酸后插入如SEQ?ID?No.2所示的核苷酸序列。