[發明專利]基于γ-分泌酶激活蛋白基因的干燥綜合征動物模型的建立方法有效
| 申請號： | 202110835547.3 | 申請日： | 2021-07-23 |
| 公開（公告）號： | CN113558011B | 公開（公告）日： | 2022-05-10 |
| 發明（設計）人： | 賈二濤;張劍勇 | 申請（專利權）人： | 深圳市中醫院 |
| 主分類號： | C12N15/90 | 分類號： | C12N15/90 |
| 代理公司： | 深圳市深弘廣聯知識產權代理事務所(普通合伙) 44449 | 代理人： | 向用秀 |
| 地址： | 518000 廣東*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 基于 分泌 激活 蛋白 基因 干燥 綜合征 動物 模型 建立 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種基于γ-分泌酶激活蛋白基因的干燥綜合征動物模型的建立方法，其特征在于：
小鼠Gsap基因位于小鼠5號染色體上；其中共鑒定出31個外顯子，ATG起始密碼子位于外顯子1，TGA終止密碼子位于外顯子31；突變位P118位于外顯子5上；外顯子5將被選為目標位點；
與基因正向鏈匹配的gRNA靶序列：gRNA1：AATGACCTTCAGCCAGGTAATGG；通過同源性定向修復，將供體寡核苷酸P118T(CCA-ACA)突變位點導入第5外顯子；
將小鼠Gsap基因的gRNA、含P118T(CCA-to-ACA)突變位點的供體寡核苷酸和cas9mRNA一起注射到受精卵中產生靶向敲除子代；用PCR方法鑒定F0代小鼠，并進行序列分析，與野生型小鼠雜交，進行種系傳遞和F1代動物的研究，最終獲得的干燥綜合征動物模型小鼠為純合子。
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