[發明專利]一種微量精子冷凍保存載體及相應的冷凍和解凍方法

在審

• 申請號: 202110831967.4
• 申請日: 2021-07-22
• 公開（公告）號: CN113491267A
• 公開（公告）日: 2021-10-12
• 發明（設計）人: 張端軍;朱海琴;姚文亮;陳勝輝;張明亮;楊麗娟;李琳;蔣祥龍;彭麗英;劉淑娟;鄭小挺;熊奇;黃玉芳;胡碩楠;孫迎利
• 申請（專利權）人: 南昌市生殖醫院;南昌大學第二附屬醫院
• 主分類號: A01N1/02
• 分類號: A01N1/02
• 代理公司: 深圳紫晴專利代理事務所(普通合伙) 44646
• 代理人: 張歡歡

本發明提供一種微量精子冷凍保存載體及相應的冷凍和解凍方法，包括外套管和蓋子，所述蓋子與所述外套管相適配，所述外套管的上下端面均為貫穿開口；承載斗，所述承載斗固定安裝在所述外套管內，所述承載斗的底部為尖端狀，所述承載斗的內角為60°；張力弧片，所述張力弧片固定安裝在所述承載斗內，所述外套管、承載斗和張力弧片均為透明分子制成。本發明提供的微量精子冷凍保存載體、裝置及相應的冷凍和解凍方法具有提高復蘇回收率、易于發現、降低對復蘇后精子細胞膜損傷、避免污染、便于推廣應用的優點。

技術領域

本發明涉及精子冷凍保存技術領域，尤其涉及一種微量精子冷凍保存載體及相應的冷凍和解凍方法。

背景技術

環境污染日趨嚴重、激素濫用等導致男性精子質量和數量不斷下降，男性不育比例日益增高，世界范圍內由于男性不育問題導致的不育大約占40-50％，而無精子癥大約占男性不育問題的10％，影響著全世界1％的男性人群，而且無精子癥的發生率會逐漸升高。

無精子癥患者在以前是無法擁有自己遺傳學意義上的孩子，而隨著輔助生殖技術的發展，無精子癥患者可以通過經皮附睪精子抽吸術(PESA)、睪丸切開取精術(TESA)、顯微睪丸切開取精術(MESE)等技術來獲取少量的精子，再通過卵胞漿內單精子注射(ICSI)將精子注射到卵母細胞中，最后將形成的胚胎移植到女性宮腔內獲得臨床妊娠。但是反復的取精術可能造成睪丸、附睪組織纖維化，導致睪丸萎縮、生精功能退化。因此將少量活動精子冷凍保存起來，既減輕患者因為反復穿刺所帶來的痛苦和經濟負擔，又可以很大程度上避免取卵日因無可用精子而取消受精。

與常規精液冷凍相比，微量精子凍存由于精子數量少，復蘇后精子活率及回收率低，冷凍難度較大。微量精子凍存首先應選擇合適的精子凍融載體。為了有效保存這些微量精子，國內外學者采用各種不同的載體來冷凍微量精子，這些載體包括了常規冷凍管、麥管、透明帶、冷凍環和ICSI注射針等。精子頭部直徑4-5μm，尾部長40-50μm，應用常規冷凍管或麥管，冷凍前要用冷凍保護劑稀釋，目前所制備的冷凍保護劑大多為簡單甘油，導致解凍后精子直線運動及宮頸黏膜穿透試驗效果較差，稀釋及管壁粘附使得精子密度進一步降低，復蘇后回收率低，甚至難以發現，且由于冷凍過程中細胞內冰晶形成等因素會導致復蘇后精子細胞膜損傷嚴重，導致無法用于后續的輔助生殖治療。另外一些研究利用人類和小鼠的空透明帶冷凍微量精子，但人卵透明帶較難獲得，且可能存在污染的問題，難以推廣應用。冷凍環、ICSI注射針也有被應用于微量精子冷凍，但精子加載難度較大。

因此，有必要提供一種新的微量精子冷凍保存載體及相應的冷凍和解凍方法解決上述技術問題。

發明內容

本發明解決的技術問題是提供一種具有提高復蘇回收率、易于發現、降低對復蘇后精子細胞膜損傷、避免污染、便于推廣應用的微量精子冷凍保存載體、裝置及相應的冷凍和解凍方法。

為解決上述技術問題，本發明提供的微量精子冷凍保存載體包括：外套管和蓋子，所述蓋子與所述外套管相適配，所述外套管的上下端面均為貫穿開口；承載斗，所述承載斗固定安裝在所述外套管內，所述承載斗的底部為尖端狀，所述承載斗的內角為60°；張力弧片，所述張力弧片固定安裝在所述承載斗內，所述外套管、承載斗和張力弧片均為透明分子制成。

優選的，所述外套管以所述承載斗為界限分為存放區和速冷擴展接觸區，所述存放區位于所述速冷擴展接觸區的上方，所述存放區的體積小于所述速冷擴展接觸區的體積，所述存放區的內壁上開設有內螺紋，所述蓋子上開設有外螺紋，所述外螺紋與所述內螺紋相適配。

優選的，所述承載斗以所述張力弧片為界限分為液留區和放置區，所述液流區位于所述放置區的上方，所述液流區的體積大于所述放置區的體積，所述液流區與所述存放區相連通。

優選的，所述張力弧片的內槽形成張力形成區，所述張力形成區的底部內壁上開設有張力形成口，所述張力形成區與所述液流區相連通，所述張力形成口與所述放置區相連通。