[發明專利]干酪乳桿菌發酵濾液、制備方法及其應用

在審

• 申請號: 202110831556.5
• 申請日: 2021-07-22
• 公開（公告）號: CN113493753A
• 公開（公告）日: 2021-10-12
• 發明（設計）人: 張天萌;朱倩倩;劉金釗;張由恒;余濟源;溫亮亮;張曉鷗;王玉玲;張泊溪;郭學平
• 申請（專利權）人: 華熙生物科技股份有限公司;山東華熙海御生物醫藥有限公司;華熙生物科技（天津）有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A61K8/99;A61Q19/08;A61Q19/00;C12R1/245
• 代理公司: 北京唐頌永信知識產權代理有限公司 11755
• 代理人: 劉偉;任瑋靜

1.一種干酪乳桿菌發酵濾液，其由包含下述步驟的方法制備得到：

將干酪乳桿菌接種到種子培養基中進行培養，得到種子液；

將種子液接種到含有麥芽提取物和氯化鈣的發酵培養基中進行發酵，得到發酵液；

將所述發酵液進行離心、過濾處理得到干酪乳桿菌發酵濾液。

2.根據權利要求1所述的干酪乳桿菌發酵濾液，其中，所述干酪乳桿菌為干酪乳桿菌(Lactobacillus paracasei)CCFM1157，其保藏編號為GDMCC No.61497；

優選的，所述麥芽提取物的濃度為0.1-0.9g/L，優選為0.2-0.8g/L，進一步優選為0.5g/L；所述氯化鈣的濃度為0.02-0.50g/L，優選為0.05-0.35g/L，進一步優選為0.2g/L；

優選的，所述發酵培養基還包括如下濃度的各組分：碳源6.00-16.00g/L，優選為8.00-14.00g/L，氮源4-14g/L，優選為6-12g/L，無機鹽1.5-12g/L，優選為3-12g/L以及表面活性劑0.10-2.25ml/L，優選為0.30-1.75ml/L；

優選的，碳源為葡萄糖，氮源為3.00-9.00g/L的胰蛋白胨和1.00-5.00g/L的酵母粉，優選為4.00-8.00g/L的胰蛋白胨和2.00-4.00g/L的酵母粉，無機鹽為0.80-4.00g/L的無水乙酸鈉、0.50-4.00g/L的檸檬酸氫二銨、0.10-1.20g/L的七水硫酸鎂、0.05-0.85g/L的一水硫酸錳和0.05-0.85g/L的三水合磷酸氫二鉀，優選為1.00-3.00g/L的無水乙酸鈉、1.00-3.00g/L的檸檬酸氫二銨、0.20-0.87g/L的七水硫酸鎂、0.10-0.46g/L的一水硫酸錳和1.00-3.75g/L的三水合磷酸氫二鉀，表面活性劑為吐溫80。

3.根據權利要求1或2所述的干酪乳桿菌發酵濾液，其中，種子液的接種量為0.5-5％(v/v)；

優選的，發酵溫度為25-40℃，優選為33-38℃，

優選的，發酵時間為15-45h，優選為20-30h；

優選的，發酵壓力為0.01-0.05MPa；

優選的，發酵液中的OD₆₀₀為2.0-6.0，優選為3.0-5.2；

優選的，發酵液的pH為3.0-5.0，優選為3.6-4.2，

優選的，發酵液殘糖濃度為0-1.0g/L；

優選的，所述種子液的OD₆₀₀在4.0以上，優選為4.3-5.5；

優選的，在得到種子液的步驟中，其包括將干酪乳桿菌接種到種子培養基中培養10-20h得到一級種子液，然后將所述一級種子液接種到種子培養基中進行培養得到所述種子液；

優選的，所述一級種子液的接種量為0.5-5.0％(v/v)；

優選的，所述種子培養基為MRS培養基；

優選的，所述干酪乳桿菌發酵濾液包含以下組分：蛋白質、糖、氨基酸、乙酸、乳酸、維生素B6、維生素PP和葉酸。

4.一種制備干酪乳桿菌發酵濾液的方法，其包括下述步驟：

將干酪乳桿菌接種到種子培養基中進行培養，得到種子液；

將種子液接種到含有麥芽提取物和氯化鈣的發酵培養基中進行發酵，得到發酵液；

將所述發酵液進行離心、過濾處理得到干酪乳桿菌發酵濾液。