[發(fā)明專利]氯化兩面針堿新納米制劑制備方法和抗肝癌應(yīng)用及驗(yàn)證方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202110829163.0
• 申請日: 2021-07-22
• 公開（公告）號: CN113633612A
• 公開（公告）日: 2021-11-12
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李丹妮;張旗穎
• 申請（專利權(quán)）人: 廣西民族大學(xué)
• 主分類號: A61K9/107
• 分類號: A61K9/107;A61K31/4741;A61K47/22;A61K47/54;A61K47/60;A61K47/69;A61P1/16;A61P35/00;C08G65/333;G01N21/35;G01N21/3577;G01N24/08
• 代理公司: 北京卓嵐智財(cái)知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 11624
• 代理人: 任漱晨

本發(fā)明公開了氯化兩面針堿新納米制劑制備方法和抗肝癌應(yīng)用及驗(yàn)證方法，屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，制劑制備方法包括如下，將葉酸改性聚乙二醇1000維生素E琥珀酸酯進(jìn)行合成，修飾氯化兩面針堿納米膠束得到氯化兩面針堿新納米制劑，對氯化兩面針堿新納米制劑進(jìn)行物理性質(zhì)和化學(xué)性質(zhì)，氯化兩面針堿新納米靶向制劑體內(nèi)外對肝癌靶向抗腫瘤能力的評價(jià)。對FA基團(tuán)和TPGS?FA亞甲基的質(zhì)子信號進(jìn)行積分，紫外?可見分光譜圖證明FA成功偶聯(lián)到TPGS樹枝狀大分子，TPGA?FA/NC納米膠束在280nm處有強(qiáng)吸收峰得到證明，藥物顆粒主要分布在細(xì)胞內(nèi)，并與藍(lán)色細(xì)胞核結(jié)合，起到破壞腫瘤細(xì)胞DNA功能，阻礙腫瘤細(xì)胞增殖，結(jié)果證明氯化兩面針堿納米新制劑體內(nèi)外對肝癌具有靶向作用。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及氯化兩面針堿新納米制劑制備方 法和抗肝癌應(yīng)用及驗(yàn)證方法。

背景技術(shù)

兩面針別名入地金牛、入山虎、花椒刺等，為蕓香科花椒屬植物兩面 針的干燥根，味苦、辛,性溫，有小毒。祛風(fēng)活血,麻醉止痛,清熱解毒,消腫, 止血。主治風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎,坐骨神經(jīng)痛,腰肌勞損、胃痛,腹 痛,牙痛,咽喉腫痛,感冒頭痛,胃潰瘍,十二指腸潰瘍、腸道蛔蟲,跌打損傷,外 傷出血,毒蛇咬傷。內(nèi)服3-9克。氯化兩面針堿屬于苯菲啶型生物堿,是入山 虎干燥根提取的一種生物堿。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道,氯化兩面針堿對LEWIS肺癌、 人體鼻咽癌、肝癌、慢性粒細(xì)胞白血病等均有抑制作用。

肝癌問題是復(fù)雜的,涉及的病理環(huán)節(jié)很多,單用某一種藥難以適應(yīng)這種 復(fù)雜病情。特別腫瘤組織的微環(huán)境不同于正常的組織，由于腫瘤細(xì)胞快速 增殖及造成的血管密度降低和血管不規(guī)則，腫瘤細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)中充 滿了相互連接的膠原網(wǎng)絡(luò)和水凝膠狀糖胺聚糖，因此腫瘤組織具有致密的 粘性ECM和較高的間質(zhì)壓。此外，由于腫瘤區(qū)域血管異常增殖，具有不 連續(xù)基膜的新生內(nèi)皮細(xì)胞，使血管壁滲透性增強(qiáng)，小于200nm的納米粒子 能穿透血管進(jìn)入組織間隙，而功能性淋巴管的相對缺乏導(dǎo)致納米粒子在腫 瘤區(qū)域更多的保留，此為腫瘤的促進(jìn)通透性和保留(EPR)效應(yīng)。由于腫 瘤細(xì)胞生長過快，腫瘤血管生成速度相對滯后，且腫瘤血管生成不均勻， 導(dǎo)致腫瘤區(qū)域供氧不足，存在不同程度的低氧和壞死區(qū)域。由于新陳代謝 異常及組織缺氧，瓦博格效應(yīng)促使腫瘤細(xì)胞進(jìn)行大量糖代謝活動(dòng)，將葡萄 糖轉(zhuǎn)化成乳酸，淋巴功能紊亂導(dǎo)致大量乳酸積累在腫瘤區(qū)域，使周圍環(huán)境 呈微酸性(pH值為6.0–7.0)。因此現(xiàn)在還有沒有較好治療肝癌的藥物。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供氯化兩面針堿新納米制劑制備方法和抗肝癌應(yīng) 用及驗(yàn)證方法，解決背景技術(shù)中提到的技術(shù)問題。

氯化兩面針堿新納米制劑制備方法，所述方法包括如下步驟：

步驟1：將葉酸改性聚乙二醇1000維生素E琥珀酸酯進(jìn)行合成，然 后表征；

步驟2：使用葉酸改性聚乙二醇1000維生素E琥珀酸酯修飾氯化兩 面針堿納米膠束得到氯化兩面針堿新納米制劑；

步驟3：對氯化兩面針堿新納米制劑進(jìn)行物理性質(zhì)和化學(xué)性質(zhì)；

步驟4：氯化兩面針堿新納米靶向制劑對肝癌細(xì)胞靶向抗腫瘤能力的 評價(jià)，制備完成。

進(jìn)一步地，所述步驟1的具體過程為：3.8g對甲苯磺酰氯(PTSC中加 入20gTPGS在100ml的CH2Cl2溶液中，在室溫下磁力攪拌滴加28mL 三乙胺，反應(yīng)12h后，用1mol/mL鹽酸室溫萃取，將無水硫酸鎂加入有機(jī) 相中，攪拌、過濾，并在室溫下濃縮，室溫下將冷無水乙醚滴加到冷凝濾 液中，將白色沉淀在40℃下干燥，TPGS-PTSC配合物是在40mL N,N-二 甲基甲酰胺(DMF)的N2下溶解得到的，然后將乙二胺加入到TPGS-PTSC 溶液中，在40℃下劇烈攪拌24小時(shí)得到TPGS-NH2配合物；