[發(fā)明專利]一種尼日利亞菌素衍生物及其制備方法和在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202110813502.6
• 申請日: 2021-07-19
• 公開（公告）號: CN113527325A
• 公開（公告）日: 2021-10-22
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 王俊鋒;王雪妮;劉永宏
• 申請（專利權(quán)）人: 中國科學(xué)院南海海洋研究所;南方海洋科學(xué)與工程廣東省實驗室（廣州）
• 主分類號: C07D493/10
• 分類號: C07D493/10;A61P35/00;A61P35/04;A61P13/08;C12P17/18;C12N1/20;C12R1/465
• 代理公司: 廣州科粵專利商標代理有限公司 44001
• 代理人: 胡素麗;劉明星

本發(fā)明公開了一種尼日利亞菌素衍生物及其制備方法和在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用，屬于天然產(chǎn)物領(lǐng)域。本發(fā)明從海洋鏈霉菌Streptomyces sp.HNM0561中分離到的式(I)的尼日利亞菌素29位甲基化衍生物29?O?methylnigericin，可用于制備抗前列腺腫瘤藥物，本發(fā)明為開發(fā)新的抗前列腺腫瘤藥物提供了良好的化合物，對開發(fā)中國海洋微生物藥物資源具有重要的意義。

技術(shù)領(lǐng)域：

本發(fā)明屬于天然產(chǎn)物領(lǐng)域，具體涉及一種尼日利亞菌素衍生物及其制備方法和在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

據(jù)世界衛(wèi)生組織國際癌癥研究機構(gòu)(IARC)公布數(shù)據(jù)顯示，2020年全球新發(fā)癌癥病例1929萬例，癌癥死亡病例996萬例，其中我國新發(fā)病例和死亡人數(shù)均位居全球第一。2020年全球男性新發(fā)癌癥1007萬例，占總?cè)藬?shù)的52％，其中前列腺癌(Prostate Cancer，PCa)是一種威脅全球男性健康的重大疾病。2020年最新數(shù)據(jù)顯示，男性新發(fā)癌癥中前列腺癌患癌人數(shù)達141萬，僅次于第一位的肺癌(144萬)。多年來，研究者致力于尋取新型、高效、低毒的抗腫瘤化合物，天然產(chǎn)物是研發(fā)新型抗腫瘤藥物等人類重大疾病用藥的寶貴資源，特別是海洋來源天然產(chǎn)物，從中篩選發(fā)現(xiàn)藥物候選物，其活性要遠高于許多其它成藥來源的化合物，在抗腫瘤藥物研發(fā)過程中具有舉止輕重的地位。我國已上市的海洋類藥物治療領(lǐng)域主要集中于心血管類藥物，抗腫瘤用途的海洋類藥物亟需開發(fā)。因此，本發(fā)明人從海洋微生物中篩選發(fā)現(xiàn)具有良好抗腫瘤活性的天然產(chǎn)物對于抗前列腺癌藥物研發(fā)具有重要意義。

發(fā)明內(nèi)容：

本發(fā)明的第一個目的是提供一種化合物，所述化合物為29-O-methylnigericin，其結(jié)構(gòu)如式(Ⅰ)：

本發(fā)明人通過對一株海洋鏈霉菌HNM0561搖床放大發(fā)酵和發(fā)酵提取物提取純化，從中得到化合物1。經(jīng)結(jié)構(gòu)分析，化合物1被確定為尼日利亞菌素29-O-methylnigericin，為本發(fā)明人首篩選并分離純化的天然產(chǎn)物。通過對化合物1的抗腫瘤活性評價，發(fā)現(xiàn)化合物1對五種人前列腺癌細胞PC3、22RV1、LNCaP、DU145和VCaP顯示出較好的抑制作用，尤其是前列腺癌細胞PC3、22RV1和LNCaP的IC₅₀分別達到了1.69，1.91和0.73μM，可以做為抗前列腺癌藥物開發(fā)的候選先導(dǎo)化合物。

本發(fā)明的第二個目的是提供所述化合物29-O-methylnigericin或其藥用鹽在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。優(yōu)選地，所述腫瘤為前列腺癌。

本發(fā)明的第三個目的是提供一種化合物29-O-methylnigericin的制備方法，包括以下步驟：

1)將海洋鏈霉菌Streptomyces sp.HNM0561接種到發(fā)酵培養(yǎng)基中培養(yǎng)，獲得發(fā)酵培養(yǎng)物；

2)分離發(fā)酵液和菌絲體，將發(fā)酵液用乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯萃取液濃縮得發(fā)酵液浸膏；

3)菌絲體經(jīng)丙酮水溶液浸提，提取液經(jīng)濃縮后，再用乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯萃取液濃縮得菌絲體浸膏；

4)合并發(fā)酵液浸膏和菌絲體浸膏，用反相硅膠分離，采用甲醇：水從10:90,20:80,30:70,50:50,70:30,80:20,90:10,100:0,v/v梯度洗脫順序得8個組分Fr1-Fr8，收集甲醇：水80：20v/v洗脫的組分Fr6，經(jīng)Sephadex LH-20柱層析，以甲醇為洗脫劑，洗脫純化后的產(chǎn)物，經(jīng)高效液相純化得到尼日利亞菌素29位甲基化衍生物29-O-methylnigericin。

在一優(yōu)選例中，所述的制備海洋鏈霉菌Streptomyces sp.HNM0561的發(fā)酵培養(yǎng)物是將海洋鏈霉菌Streptomyces sp.HNM0561接種到發(fā)酵培養(yǎng)基中培養(yǎng)，所述的發(fā)酵培養(yǎng)基每1000mL含有：葡萄糖20g，酵母膏10g，牛肉膏3g，玉米漿3g，可溶性淀粉10g，磷酸氫二鉀0.5g，硫酸鎂0.5g，碳酸鈣2g，余量為水。