[發(fā)明專利]一種篩選小細(xì)胞肺癌藥物新靶點(diǎn)的方法及其應(yīng)用在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 202110801375.8 | 申請日: | 2021-07-15 |
| 公開(公告)號: | CN113528665A | 公開(公告)日: | 2021-10-22 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | 鄭其平;王石雷 | 申請(專利權(quán))人: | 深圳市泰爾康生物醫(yī)藥科技有限公司 |
| 主分類號: | C12Q1/6886 | 分類號: | C12Q1/6886;C12Q1/686;C12N15/11 |
| 代理公司: | 北京哌智科創(chuàng)知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11745 | 代理人: | 陳培生 |
| 地址: | 518000 廣東省深圳市坪山區(qū)坑梓街道*** | 國省代碼: | 廣東;44 |
| 權(quán)利要求書: | 查看更多 | 說明書: | 查看更多 |
| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 一種 篩選 細(xì)胞 肺癌 藥物 新靶點(diǎn) 方法 及其 應(yīng)用 | ||
本發(fā)明公開了小細(xì)胞肺癌藥物靶點(diǎn)領(lǐng)域的一種篩選小細(xì)胞肺癌藥物新靶點(diǎn)的方法及其應(yīng)用,通過設(shè)計(jì)不同的引物,然后通過qPCR實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)了生長抑素受體2(SSTR2)在小細(xì)胞肺癌細(xì)胞表面高表達(dá),發(fā)現(xiàn)在非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系NCI?H69和NCI?H446上高表達(dá)SSTR2蛋白,表明SSTR2可以作為一個(gè)潛在的藥物靶點(diǎn),有助于廣大藥物開發(fā)者針對小細(xì)胞肺癌進(jìn)行靶向藥物的研發(fā)。
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明涉及小細(xì)胞肺癌藥物靶點(diǎn)領(lǐng)域,具體是一種篩選小細(xì)胞肺癌藥物新靶點(diǎn)的方法 及其應(yīng)用。
背景技術(shù)
小細(xì)胞肺癌約占總肺癌種類的15%-20%,相較于其他類型的肺癌,小細(xì)胞肺癌通常有 更好的化療及放療療效,然而,由于小細(xì)胞肺癌確診時(shí)多數(shù)已有腫瘤的廣泛擴(kuò)散,因此, 小細(xì)胞肺癌往往預(yù)后較差;人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCI-H69細(xì)胞,又稱H69細(xì)胞,源自患有小細(xì)胞肺癌的白人男性,有多種癌相關(guān)基因表達(dá),如c-myb,v-fes,v-fms,c-raf 1, Ha-ras,Ki-ras and N-ras等;NCI-H446細(xì)胞是從一位小細(xì)胞肺癌患者的胸水中建立的, NCI-H446細(xì)胞是小細(xì)胞肺癌的生化和形態(tài)學(xué)上的變種,表達(dá)神經(jīng)元特有的烯醇酶和腦部 肌酸激酶同功酶,其C-myc DNA序列擴(kuò)增約20倍,c-myc RNA比正常細(xì)胞增加15倍,G 蛋白偶聯(lián)受體家族(GPCRs)是目前已知的、最大的受體家族,也是現(xiàn)代藥物開發(fā)中研究 得最多的領(lǐng)域,生長抑素受體(SSTR)是GPCRs家族的成員之一,分SSTR1—5五個(gè)亞 型。
目前全球范圍內(nèi)還沒有針對小細(xì)胞肺癌的靶向藥物上市,主要原因是目前沒有發(fā)現(xiàn)小 細(xì)胞肺癌的有效靶點(diǎn)。
因此,本發(fā)明提供了一種篩選小細(xì)胞肺癌藥物新靶點(diǎn)的方法及其應(yīng)用,以解決上述背 景技術(shù)中提出的問題。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種篩選小細(xì)胞肺癌藥物新靶點(diǎn)的方法及其應(yīng)用,以解決上述 背景技術(shù)中提出的問題。
為實(shí)現(xiàn)上述目的,本發(fā)明提供如下技術(shù)方案:
一種篩選小細(xì)胞肺癌藥物新靶點(diǎn)的方法及其應(yīng)用,通過設(shè)計(jì)不同的引物,然后通過qPCR實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)了生長抑素受體2(SSTR2)在小細(xì)胞肺癌細(xì)胞表面高表達(dá)。
一種篩選小細(xì)胞肺癌藥物新靶點(diǎn)的方法,其實(shí)驗(yàn)步驟為:
S1:通過RNA提取試劑盒提取小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系NCI-H69和NCI-H446細(xì)胞總RNA,測定其含量;
S2:按照下表準(zhǔn)備逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)液,補(bǔ)水至終體積為20μL。輕柔混勻準(zhǔn)備好的逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)液,短暫離心:
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