[發明專利]一種篩選小細胞肺癌藥物新靶點的方法及其應用在審
| 申請號： | 202110801375.8 | 申請日： | 2021-07-15 |
| 公開（公告）號： | CN113528665A | 公開（公告）日： | 2021-10-22 |
| 發明（設計）人： | 鄭其平;王石雷 | 申請（專利權）人： | 深圳市泰爾康生物醫藥科技有限公司 |
| 主分類號： | C12Q1/6886 | 分類號： | C12Q1/6886;C12Q1/686;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京哌智科創知識產權代理事務所(普通合伙) 11745 | 代理人： | 陳培生 |
| 地址： | 518000 廣東省深圳市坪山區坑梓街道*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 篩選 細胞 肺癌 藥物 新靶點 方法 及其 應用 | ||
1.一種篩選小細胞肺癌藥物新靶點的方法及其應用，通過設計不同的引物，然后通過qPCR實驗發現了生長抑素受體2(SSTR2)在小細胞肺癌細胞表面高表達。
2.根據權利要求1所述的一種篩選小細胞肺癌藥物新靶點的方法，其實驗步驟為：
S1：通過RNA提取試劑盒提取小細胞肺癌細胞系NCI-H69和NCI-H446細胞總RNA，測定其含量；
S2：按照下表準備逆轉錄反應液，補水至終體積為20μL。輕柔混勻準備好的逆轉錄反應液，短暫離心：
混合液組分 體積 質量或20μl濃度 SureScript RTase Mix(20×) 1μL 1× SureScript RT Reaction Buffer(5×) 4μL 1× Total RNA或者poly A RNA 1μg或者10ng 2O(RNase/DNase free)]]> 補水至20μL
S3：反轉錄反應程序設置：
溫度 時間 25℃ 5min 42℃ 30min 85℃ 5min 4℃ hold
S4：按照下表內容，在4℃(冰上)或者室溫準備qPCR反應液：
S5：輕柔混勻qPCR預混液并短暫離心，按照反應體系說明將預混液加入PCR反應管中，短暫離心確保預混反應液填充滿PCR反應管底部；
S6：根據下表設置二步法qPCR程序進行qPCR反應。
3.根據權利要求1所述的一種篩選小細胞肺癌藥物新靶點的方法及其應用，其特征在于：引物序列如下：
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