[發(fā)明專利]一種托吡司特中兩個基因毒性雜質的分離和測定方法

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• 申請?zhí)枺?/td>: 202110798127.2
• 申請日: 2021-07-15
• 公開（公告）號: CN113466378A
• 公開（公告）日: 2021-10-01
• 發(fā)明（設計）人: 劉永波;蔡蓓蕾;王金玲
• 申請（專利權）人: 江蘇知原藥業(yè)股份有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/34;G01N30/72;G01N30/74
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發(fā)明公開了一種托吡司特中兩個基因毒性雜質的分離和測定方法，包括以下步驟：取托吡司特適量，置于容量瓶中，加稀釋劑溶解并稀釋，作為供試品溶液；分別取TP02?IMP?A和TP?IMP?A對照品適量，置于容量瓶中，用稀釋劑溶解并稀釋，作為對照品溶液；精密量取供試品溶液和對照品溶液各50μL，分別注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖；分別取托吡司特、TP02?IMP?A和TP?IMP?A對照品各適量，置于容量瓶中，用稀釋劑溶解并稀釋，作為系統(tǒng)適用性溶液；精密量取50μL系統(tǒng)適用性溶液，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，相鄰色譜峰之間的分離度應不小于1.5。本發(fā)明的托吡司特的檢測方法線性關系良好，重復性高，結果準確靈敏、穩(wěn)定可靠，適用范圍廣。

技術領域

本發(fā)明涉及分析檢測技術領域，特別涉及一種托吡司特中兩個基因毒性雜質的分離和測定方法。

背景技術

托吡司特是一個新型的黃嘌呤氧化酶（XOR）抑制劑，選擇性和可逆性地抑制XOR的合成，從而在嘌呤代謝的過程中抑制尿酸的產生，對痛風起到治療作用。托吡司特的中文名為：4-[5-（吡啶-4-基）-1H-1，2，4三氮唑-3-基]吡啶-2-腈，英文名為：4-[5-(pyridin-4-yl)-1H -1,2,4-triazol-3-yl]pyridine-2-carbonitrile，其化學結構式如下：

基因毒性雜質是指能直接或間接損傷細胞DNA，產生致突變和致癌作用的物質。在藥物活性物質中沒有出現的基因毒性反應物和有基因毒性結構的物質，被稱為潛在基因毒性雜質。在生產過程中，可能產生基因毒性雜質的環(huán)節(jié)包括新藥合成、原料藥純化、儲存運輸（與包裝物接觸）等，故在新藥合成階段應該指明涉及到的所有具有基因毒性或有致癌性的化學物質并采取有效的分析方法進行研究和控制。

在托吡司特的合成中，存在TP02-IMP-A和TP-IMP-A兩個中間體，均含有肼的化學式結構，化學結構式分別如下：

TP02-IMP-A：

TP-IMP-A：

目前托吡司特片尚未在國內上市，未被各國藥典收錄，未見關于雜質TP02-IMP-A和TP-IMP-A的檢測文獻報道。為了控制托吡司特的質量，保證用藥的安全性，需要在托吡司特中對這2個基因毒性雜質進行嚴格控制。本發(fā)明對分離測定托吡司特中兩個基因毒性雜質的高效液相色譜方法進行了摸索。

發(fā)明內容

本發(fā)明的目的是提供一種托吡司特中兩個基因毒性雜質的分離和測定方法，解決上述現有技術問題中的一個或者多個。

本發(fā)明提供的一種托吡司特中兩個基因毒性雜質的分離和測定方法，包括以下步驟：

（1）取托吡司特適量，置于容量瓶中，加稀釋劑溶解并稀釋，作為供試品溶液；分別取TP02-IMP-A和TP-IMP-A對照品適量，置于容量瓶中，用稀釋劑溶解并稀釋，作為對照品溶液；

（2）精密量取供試品溶液和對照品溶液各50μL，分別注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖；

（3）分別取托吡司特、TP02-IMP-A和TP-IMP-A對照品各適量，置于容量瓶中，用稀釋劑溶解并稀釋，作為系統(tǒng)適用性溶液；

（4）精密量取50μL系統(tǒng)適用性溶液，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，相鄰色譜峰之間的分離度應不小于1.5。

在某些實施方案中，稀釋劑為磷酸與乙腈的混合液，其中：磷酸的質量百分含量為1%，磷酸與乙腈的體積比為90:10。

在某些實施方案中，高效液相色譜儀測定時采用梯度洗脫。

在某些實施方案中，流動相包括流動相A和流動相B，流動相A為1%磷酸，流動相B為乙腈。

在某些實施方案中，梯度洗脫的程序如下表所示：

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