[發明專利]一種單人份血漿中組織型纖溶酶原激活劑-抑制劑1復合體測定試劑盒及檢測方法

在審

• 申請號: 202110797211.2
• 申請日: 2021-07-14
• 公開（公告）號: CN113533753A
• 公開（公告）日: 2021-10-22
• 發明（設計）人: 余正;王偉杰;謝露丹;周帥輝;李帥鵬;劉萌;從婕;陳祥;白仲虎
• 申請（專利權）人: 江蘇拜明生物技術有限公司
• 主分類號: G01N33/86
• 分類號: G01N33/86;G01N33/58;G01N33/577;G01N21/76
• 代理公司: 無錫盛陽專利商標事務所(普通合伙) 32227
• 代理人: 顧吉云;郭金玉

本發明提供了一種單人份血漿中組織型纖溶酶原激活劑?抑制劑1復合體測定試劑盒及檢測方法。該試劑盒檢測速度快、靈敏度高、特異性能好、變異系數小，各試劑組分穩定性良好。一種單人份血漿中組織型纖溶酶原激活劑?抑制劑1復合體測定試劑盒，其特征在于：包括試劑條，所述試劑條包括3個以上的試劑孔位，所述試劑條的其中兩個試劑孔位封裝有試劑一和試劑二、其中一個試劑孔位由鏈霉親和素包被；試劑一為濃度2.6μg/mL的生物素標記的組織型纖溶酶原激活劑?抑制劑1復合體抗體溶液，試劑二為濃度0.24μg/mL的辣根過氧化物酶標記的組織型纖溶酶原激活劑?抑制劑1復合體抗體的溶液。

技術領域

本發明屬于醫療器械類體外診斷領域，具體涉及一種單人份血漿中組織型纖溶酶原激活劑-抑制劑1復合體測定試劑盒及檢測方法。

背景技術

組織型纖溶酶原激活劑-抑制劑1復合體（tPAI·C），是在人體內廣泛存在的調節機體纖溶過程和凝血過程的重要因子。它是由組織型纖溶酶原激活劑（tissue-plasminogen activator，tPA）和纖溶酶原激活物抑制劑-1（plasminogen activatorinhibitor-1，PAI-1）結合而形成的復合物。

組織型纖溶酶原激活劑是一種單鏈糖蛋白，主要由血管內皮細胞合成并分泌，其對于纖維蛋白具有較高的親和力，可將酪氨酸纖溶酶原轉化成纖溶酶，從而達到降解部分凝血因子以及纖維蛋白的作用，還可解聚團塊血小板，從而保證正常血管暢通和阻塞血管再通，是纖溶系統重要的關鍵調節物質。血漿纖溶酶原激活抑制劑（PAI）分為PAI-1和PAI-2，其中在調節血漿纖溶活性方面起重要作用的是PAI-1，PAI-1是一種單鏈糖蛋白，屬于絲氨酸蛋白酶抑制劑超家族，其是組織型纖溶酶原激活物（tPA）和尿激酶型纖溶酶原激活物（uPA）的主要抑制劑，并且在功能上用于抑制組織和血漿纖維蛋白的溶解。

當機體凝血活化時，纖維蛋白形成后可以激活合成于血管內皮細胞的組織型纖溶酶原激活劑（tPA），活化的tPA進一步激活纖溶酶原轉化為纖溶酶，纖溶酶降解纖維蛋白產生降解產物，隨后PAI-1與tPA以1:1的比例結合形成復合物tPAI-C，tPA激活纖溶酶原的活性被抑制，進而抑制纖維蛋白降解。血漿中PAI-1濃度為tPA濃度的5倍，因此可認為釋放到血液中的tPA幾乎都與PAI-1形成了復合物。tPAI-C的水平與tPA濃度及血管內皮損傷程度呈正相關，是評估兩者的直接標志物。

tPAI-C對于DIC、動靜脈血栓均有提示作用，是靜脈血栓栓塞癥（VTE）以及心梗的風險指標，其血漿水平的升高提示DIC的可能、血管內皮細胞損傷、血栓的形成，其對于DIC的診斷具有重要價值。

發明內容

針對上述問題，本發明提供了一種單人份血漿中組織型纖溶酶原激活劑-抑制劑1復合體測定試劑盒；第二，本發明還提供了適用該試劑的檢測方法；第三，本發明引入了一種新的設計，將試劑裝在特殊的試劑條中，實現單人份檢測的要求，試劑條的設計。該試劑盒用于定量測定血漿中的組織型纖溶酶原激活劑-抑制劑1復合體的濃度。

試劑組成及成分：

一種單人份血漿中組織型纖溶酶原激活劑-抑制劑1復合體測定試劑盒，其特征在于：包括試劑條，所述試劑條包括3個以上的試劑孔位，所述試劑條的其中兩個試劑孔位封裝有試劑一和試劑二、其中一個試劑孔位由鏈霉親和素包被；

試劑一為濃度2.6μg/mL的生物素標記的組織型纖溶酶原激活劑-抑制劑1復合體抗體溶液，生產抗體的單克隆細胞株來自江蘇拜明生物技術有限公司，單克隆細胞株號TPAIC25E9；

試劑二為濃度0.24μg/mL的辣根過氧化物酶標記的組織型纖溶酶原激活劑-抑制劑1復合體抗體的溶液，生產抗體的單克隆細胞株來自江蘇拜明生物技術有限公司，單克隆細胞株號TPAIC17F10；

所述測定試劑盒還包括洗液、校準品、底物溶液；

所述洗液為pH 7.5，含1%吐溫-20、0.1%Proclin300、0.05M的Tris-HCl溶液；