[發(fā)明專利]一種單人份血漿中組織型纖溶酶原激活劑-抑制劑1復(fù)合體測定試劑盒及檢測方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 202110797211.2 | 申請日： | 2021-07-14 |
| 公開（公告）號： | CN113533753A | 公開（公告）日： | 2021-10-22 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 余正;王偉杰;謝露丹;周帥輝;李帥鵬;劉萌;從婕;陳祥;白仲虎 | 申請（專利權(quán)）人： | 江蘇拜明生物技術(shù)有限公司 |
| 主分類號： | G01N33/86 | 分類號： | G01N33/86;G01N33/58;G01N33/577;G01N21/76 |
| 代理公司： | 無錫盛陽專利商標(biāo)事務(wù)所(普通合伙) 32227 | 代理人： | 顧吉云;郭金玉 |
| 地址： | 224000 江蘇省鹽城市城南新區(qū)*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 單人 血漿 組織 型纖溶酶原 激活劑 抑制劑 復(fù)合體 測定 試劑盒 檢測 方法 | ||
1.一種單人份血漿中組織型纖溶酶原激活劑-抑制劑1復(fù)合體測定試劑盒，其特征在于：包括試劑條，所述試劑條包括3個以上的試劑孔位，所述試劑條的其中兩個試劑孔位封裝有試劑一和試劑二、其中一個試劑孔位由鏈霉親和素包被；
試劑一為濃度2.6μg/mL的生物素標(biāo)記的組織型纖溶酶原激活劑-抑制劑1復(fù)合體抗體溶液，生產(chǎn)抗體的單克隆細(xì)胞株來自江蘇拜明生物技術(shù)有限公司，單克隆細(xì)胞株號TPAIC25E9；
試劑二為濃度0.24μg/mL的辣根過氧化物酶標(biāo)記的組織型纖溶酶原激活劑-抑制劑1復(fù)合體抗體的溶液，生產(chǎn)抗體的單克隆細(xì)胞株來自江蘇拜明生物技術(shù)有限公司，單克隆細(xì)胞株號TPAIC17F10；
所述測定試劑盒還包括洗液、校準(zhǔn)品、底物溶液；
所述洗液為pH 7.5，含1%吐溫-20、0.1%Proclin300、0.05M的Tris-HCl溶液；
所述校準(zhǔn)品包括濃度為0 ng/mL、3 ng/mL、12 ng/mL、48 ng/mL、100ng/mL的組織型纖溶酶原激活劑-抑制劑1復(fù)合體抗原溶液；
所述底物溶液包括底物A和底物B，底物A為含有0.4%魯米諾，pH9.0的水溶液，底物B為含有0.06%Na2B4O7 ，pH5.0的水溶液。
2.使用權(quán)利要求1所述的測定試劑盒檢測組織型纖溶酶原激活劑-抑制劑1復(fù)合體的方法，其特征在于：包括以下步驟，
第一步，將30μL待測樣本、100μL生物素標(biāo)記的組織型纖溶酶原激活劑-抑制劑1復(fù)合體抗體加到包被板中，混勻并反應(yīng)，37攝氏度，孵育10分鐘，反應(yīng)后用300μL洗液洗滌5次；
第二步，將100μL辣根過氧化物酶標(biāo)記的組織型纖溶酶原激活劑-抑制劑1復(fù)合體抗體加入鏈霉親和素包被板中混勻并反應(yīng)，37攝氏度，孵育10分鐘，反應(yīng)后用300μL洗液洗滌5次；
第三步，向上述洗滌后的反應(yīng)孔中依次加入底物A為50ul，底物B為50ul混勻，在化學(xué)發(fā)光分析儀中測定發(fā)光強(qiáng)度；
第四步，利用已知濃度的校準(zhǔn)品繪制發(fā)光強(qiáng)度標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)步驟三得到的發(fā)光強(qiáng)度對照所述標(biāo)準(zhǔn)曲線，計算得出待測血漿樣本中組織型纖溶酶原激活劑-抑制劑1復(fù)合體的含量。
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