[發明專利]利用氣相色譜法檢測安替安吉肽中殘留溶劑的方法及應用

在審

• 申請號: 202110796952.9
• 申請日: 2021-07-14
• 公開（公告）號: CN113607869A
• 公開（公告）日: 2021-11-05
• 發明（設計）人: 趙佳欣;齊碩;欒美麗;孔雙泉;宋夢薇
• 申請（專利權）人: 北京賽升藥業股份有限公司
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 孫怡

本發明涉及藥物檢測技術領域，具體公開了利用氣相色譜法檢測安替安吉肽中殘留溶劑的方法及應用。本發明的利用氣相色譜法檢測安替安吉肽中殘留溶劑的方法，其殘留溶劑為二甲基亞砜，進樣方式為直接進樣，程序升溫的方式為：起始溫度50℃?60℃，保持1?2min；再以20℃/min的升溫速率升至210℃?220℃，保持4?6min，13?16min結束。本發明的氣相色譜檢測方法，靈敏度強，專屬性、穩定性及準確度良好，能夠有效控制安替安吉肽的質量，使安替安吉肽質量達到穩定、可控及安全。

技術領域

本發明涉及藥物檢測技術領域，具體地說，涉及利用氣相色譜法檢測安替安吉肽中殘留溶劑的方法及應用。

背景技術

安替安吉肽(HM-3)是具有整合素親和性的高效血管抑制劑合成多肽，具有由18個氨基酸組成。它能夠有效抑制內皮細胞的遷移，能有效抑制人的非小細胞肺癌、肝癌、胃癌增殖。其最大特點是活性顯著，安全性好，不容易產生耐藥性(治療針對腫瘤內皮細胞，內皮細胞不容易突變)。當其合成工藝采用固項合成方法時，以Fmoc-Asp(Otbu)-wang resin為起始原料，然后用保護氨基酸依次接二肽至十八肽，該工藝過程中，可能存在溶劑殘留問題，從而影響最終產品的使用安全性，故對其質量進行檢測監控十分必要。

有鑒于此，本發明特提出一種可有效檢測安替安吉肽中殘留溶劑的方法。

發明內容

針對現有技術的問題，本發明的目的是提供一種專屬性強、穩定性及準確度好的安替安吉肽中殘留溶劑檢測方法。

為了實現該目的，本發明的技術方案如下：

一種利用氣相色譜法檢測安替安吉肽中殘留溶劑的方法，所述殘留溶劑為二甲基亞砜(DMSO)，進樣方式為直接進樣，程序升溫的方式為：起始溫度50℃-60℃，保持1-2min；再以20℃/min的升溫速率升至210℃-220℃，保持4-6min，13-16min結束。

本發明綜合考量DMSO和安替安吉肽的理化性能，最終采用直接進樣方式進行檢測，而此時將由于基質效應，而產生回收率不高的問題，故而經大量研究，本發明找到了一種可以有效解決此問題，實現安替安吉肽中殘留DMSO準確、快速、穩定檢出的方法。

優選，程序升溫的方式為：起始溫度50℃-60℃，保持1min；再以20℃/min的升溫速率升至210℃-220℃，保持5min，14min結束。

本發明的方法中，供試品濃度為10mg/mL-20mg/mL。

本發明發現在本發明的檢測體系中，不同的供試品濃度會對最終結果的準確度產生極大影響，故而找到了一種可匹配前述程序升溫方式實現理想檢測的濃度范圍。

本發明的方法中，進樣口溫度為270℃-280℃，進樣量為0.1μL-0.2μL，不分流。

本發明充分考慮了待測組分的沸點，從而設計了適合上述檢測方法的進樣方式。

本發明的方法中，檢測器為FID檢測器，檢測器溫度為240℃-250℃。

本發明的方法中，采用中極性的色譜柱。

本發明根據安替安吉肽的可揮發性特征以及市售色譜柱特色，選出了適合本檢測體系的色譜柱。

優選，色譜柱為6％-氰丙基苯基-94％二甲基聚硅氧烷毛細管柱。

更優選，色譜柱的型號為DB-624，30m×0.53mm×3μm。

本發明的方法中，氣相色譜檢測的流速為2mL/min-3mL/min。

本發明檢測體系中，DMSO的保留時間為7.1±0.5min。按外標法以峰面積計算待測樣品中二甲基亞砜的含量。

本發明還提供一種上述方法在安替安吉肽質量控制中的應用。