[發明專利]石斛質量、多糖檢測和定位物質在細胞具體位置的方法

在審

• 申請號: 202110796754.2
• 申請日: 2021-07-14
• 公開（公告）號: CN113533298A
• 公開（公告）日: 2021-10-22
• 發明（設計）人: 李明鑒;陳紹超;李鉗;黃永;楊友兵
• 申請（專利權）人: 成都特普生物科技股份有限公司;成都中醫藥大學
• 主分類號: G01N21/65
• 分類號: G01N21/65
• 代理公司: 成都科奧專利事務所(普通合伙) 51101
• 代理人: 蘇亞超

石斛質量、多糖檢測和定位物質在細胞具體位置的方法。本發明公開了一種石斛質量檢測方法，采集細胞質和淀粉粒拉曼圖譜各若干個；進一步對所述若干個細胞質和淀粉粒拉曼的圖譜進行基線校準和面積歸一化處理，得到單一的細胞質拉曼圖譜、淀粉粒拉曼圖譜和細胞壁拉曼圖譜；在所述單一的細胞質拉曼圖譜和淀粉粒拉曼圖譜中確定有差異的峰位；對所述細胞質拉曼圖譜和淀粉粒拉曼圖譜使用夾峰法進行拉曼成像，最后通過計算得出細胞質和淀粉粒的多糖含量。本發明的有益效果：實現成分無損耗，可以快速、精準反映多糖有效成分含量并定位有效成分位置。

技術領域

中藥材多糖檢測領域，尤其涉及一種操作簡單、無標記、快速檢測石斛多糖含量的方法。

背景技術

鐵皮石斛是歷代本草及中國藥典明確記載的名貴藥用植物之一，多糖是其發揮藥理學作 用的主要物質基礎，決定石斛質量的主要成分因素就是石斛多糖的含量，現有多糖的測定方 法有很多種，如斐林法、蒽酮-硫酸法、高效液相色譜法、毛細管電泳法、酶法和苯酚-硫酸 法等，上述方法的缺點：需要提取純化，檢測過程耗時，物質容易損耗，導致檢測結果不準 確，無法通過較為準確的數據判斷石斛多糖的含量，進一步的無法控制石斛的質量。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是，提供一種石斛多糖和石斛細胞物質的檢測方法，實現物 質無損耗，同時可以快速、精準反映有效成分含量，并快速定位有效成分在細胞中的具體位 置的方法。

為解決上述問題，本發明的技術方案是，

一種石斛質量的檢測方法，其特征在于，包括，

采集若干待測石斛的細胞質和淀粉粒的拉曼圖譜，獲得，每一個所述石斛的多糖拉曼圖 譜位移峰峰強；

比較所述石斛多糖拉曼圖譜的位移峰峰強，所述位移峰峰強越高，多糖含量越多，則石 斛質量越好。

一種石斛多糖的檢測方法，其特征在于，包括，

取石斛莖制作石斛切片；

將所述石斛切片放置在鍍鋁玻璃載玻片上，蓋上蓋玻片；

使用共聚焦顯微拉曼光譜儀，選擇532nm激光器；

在50-100倍物鏡下找到細胞質和淀粉粒，設置好采集參數后進行拉曼圖譜采集；

采集細胞質和淀粉粒拉曼圖譜各若干個；

對所述若干個細胞質和淀粉粒拉曼的圖譜進行基線校準和面積歸一化處理，得到單一的 細胞質拉曼圖譜和淀粉拉曼圖譜；

在所述單一的細胞質拉曼圖譜和淀粉粒拉曼圖譜中確定多糖的峰位；

根據測得的所述多糖的峰位數據直接計算出所述石斛的多糖含量。

一種定位物質在細胞具體位置的方法，其特征在于，包括，

取石斛莖制作石斛切片；

將所述石斛切片放置在鍍鋁玻璃載玻片上，蓋上蓋玻片；

使用共聚焦顯微拉曼光譜儀，選擇532nm激光器；

在50-100倍物鏡下找到細胞質和淀粉粒，設置好采集參數后進行拉曼單一光譜采集；

采集細胞質和淀粉粒拉曼圖譜各若干個；

對所述若干個細胞質和淀粉粒拉曼的圖譜進行基線校準和面積歸一化處理，得到單一的 細胞質拉曼圖譜和淀粉粒拉曼圖譜；

在所述單一的細胞質拉曼圖譜和淀粉粒拉曼圖譜中確定若干物質對應的峰位；

對所述細胞質拉曼圖譜和淀粉粒拉曼圖譜使用夾峰法進行拉曼成像，顯示出具體物質在 細胞中的具體位置。