[發明專利]石斛質量、多糖檢測和定位物質在細胞具體位置的方法

在審

• 申請號: 202110796754.2
• 申請日: 2021-07-14
• 公開（公告）號: CN113533298A
• 公開（公告）日: 2021-10-22
• 發明（設計）人: 李明鑒;陳紹超;李鉗;黃永;楊友兵
• 申請（專利權）人: 成都特普生物科技股份有限公司;成都中醫藥大學
• 主分類號: G01N21/65
• 分類號: G01N21/65
• 代理公司: 成都科奧專利事務所(普通合伙) 51101
• 代理人: 蘇亞超

1.一種石斛質量的檢測方法，其特征在于，包括，

采集若干石斛的細胞質和淀粉粒的拉曼圖譜，獲得，每一個所述石斛的多糖拉曼圖譜位移峰峰強；

比較所述石斛多糖拉曼圖譜的位移峰峰強，所述位移峰峰強越高，多糖含量越多，則石斛質量越好。

2.一種石斛多糖的檢測方法，其特征在于，包括，

取石斛莖制作石斛切片；

將所述石斛切片放置在鍍鋁玻璃載玻片上，蓋上蓋玻片；

使用共聚焦顯微拉曼光譜儀，選擇532nm激光器；

在50-100倍物鏡下找到細胞質和淀粉粒，設置好采集參數后進行拉曼圖譜采集；

采集細胞質和淀粉粒拉曼圖譜各若干個；

對所述若干個細胞質和淀粉粒拉曼的圖譜進行基線校準和面積歸一化處理，得到單一的細胞質拉曼圖譜和淀粉粒拉曼圖譜；

在所述單一的細胞質拉曼圖譜和淀粉粒拉曼圖譜中確定多糖的峰位；

根據測得的所述多糖的峰位數據直接計算出所述石斛的多糖含量。

3.一種定位物質在細胞具體位置的方法，其特征在于，包括，

取石斛莖制作石斛切片；

將所述石斛切片放置在鍍鋁玻璃載玻片上，蓋上蓋玻片；

使用共聚焦顯微拉曼光譜儀，選擇532nm激光器；

在50-100倍物鏡下找到細胞質和淀粉粒，設置好采集參數后進行拉曼圖譜采集；

采集細胞質和淀粉粒拉曼圖譜各若干個；

對所述若干個細胞質和淀粉粒拉曼的圖譜進行基線校準和面積歸一化處理，得到單一的細胞質拉曼圖譜和淀粉粒拉曼圖譜；

在所述單一的細胞質拉曼圖譜和淀粉粒拉曼圖譜中確定若干物質對應的峰位；

對所述細胞質拉曼圖譜和淀粉粒拉曼圖譜使用夾峰法進行拉曼成像，顯示出具體物質在細胞中的具體位置。

4.根據權利要求3所述的定位物質在細胞具體位置的方法，其特征在于，所述若干物質包括淀粉、C-H化物和多糖。

5.根據權利要求2所述的石斛多糖的檢測方法，其特征在于，所述切片厚度為200-500μm。

6.根據權利要求2所述的石斛多糖的檢測方法，其特征在于，所述采集參數為選擇300光柵，激光衰減片設置為50％，積分時間4s。

7.根據權利要求2所述的石斛多糖的檢測方法，其特征在于，所述采集細胞質、淀粉粒拉曼圖譜各100個。

8.根據權利要求3所述的定位物質在細胞具體位置的方法，其特征在于，所述的峰位包括，478cm^-1、840-860cm^-1、1003cm^-1、1154cm^-1、1528cm^-1、1743cm^-1和2945cm^-1。

9.根據權利要求8所述的定位物質在細胞具體位置的方法，其特征在于，分別在478cm^-1、840-860cm^-1和2945cm^-1峰位進行拉曼成像。