[發明專利]一種制備天然低分子量水母抗氧化活性肽的方法

在審

• 申請號: 202110791050.6
• 申請日: 2021-07-13
• 公開（公告）號: CN113444140A
• 公開（公告）日: 2021-09-28
• 發明（設計）人: 李榮鋒;盛菊花;王偉鋒;于華華;李鵬程
• 申請（專利權）人: 海臻（上海）生物科技有限公司
• 主分類號: C07K1/14
• 分類號: C07K1/14;C07K1/34
• 代理公司: 青島華慧澤專利代理事務所(普通合伙) 37247
• 代理人: 馬千會

本發明屬于海洋生物技術領域，涉及一種從水母中提取制備低分子量抗氧化活性肽的方法。一種制備天然低分子量水母抗氧化活性肽的方法,包括：（1）將稱量的水母勻漿絞碎；（2）在低溫條件下離心收集上清液；（3）用膜截留分子量為3,000 Da的超濾管，將步驟（2）中制備的上清液在低溫條件下離心收集濾出液；（4）將收集的濾出液冷凍干燥。本發明的方法，制備工藝簡單；制備的水母肽抗氧化活性高；無生物和化學加工，天然無毒。

技術領域

本發明屬于海洋生物技術領域，涉及一種從水母中提取制備低分子量抗氧化活性肽的方法。

背景技術

水母是海洋無脊椎動物，主要包括刺胞動物門的水螅水母、管水母、缽水母、立方水母以及櫛水母門的櫛水母五大類。全球水母種類約有1000余種，分布于全球各個水域里，資源十分豐富。尤其，近些年來，隨著海洋生態環境以及人類活動等因素的影響，致使海洋中水母數量急劇增加，并造成一系列的危害，例如：漁業產量減少、發電廠堵塞、造成人類蜇傷等。我國水母資源非常豐富，從海南、廣東、山東，一直到遼寧沿海均廣泛分布。水母中含有大量結構新穎獨特的生物活性物質，如活性酶、多肽等。而目前水母資源的利用僅是對少數幾種水母經簡單加工后，作為食品食用，附加值不高。

人體內活性氧自由基對機體產生很大的損傷作用，可造成酶失活、膜質過氧化，導致衰老、腫瘤、動脈粥樣硬化等許多疾病的發生。因此，抗氧化劑的開發和利用對人的生命健康有很重要的作用。目前，抗氧化劑分兩類，人工合成抗氧化劑和天然提取抗氧化劑。其中，人工合成的抗氧化劑，如二丁基羥基甲苯（BHT）、丁基羥基甲氧基（BHA）、丙二醇（PG）等具有較好的清除活性氧自由基的作用，常用作食品添加劑；但研究表明，BHT、BHA、PG也具有一定的毒副作用，不利于人體健康，因此人工合成抗氧化劑的使用受到嚴格限制。天然來源的抗氧化劑具有低毒等特點，所以，從自然屆中篩選對人體安全、高效的天然抗氧化劑具有著重要的意義。研究發現，水母中具有大量的天然抗氧化活性物質。因此，從水母中提取制備天然抗氧化活性肽，實現水母變廢為寶和水母資源的高值化利用，具有重要的社會意義和經濟價值。

現有肽類的提取方法主要有兩種，一種是化學法提取，一種是物理法提取。二者各有利弊，“化學提取法”主要是“化學酶反應提取法”。其反應快，生產量大，但缺點是提取出來的肽類活性較低，并且提取出的肽類產品中多少會殘留蛋白酶，該法是市面上肽類產品的主要來源。“物理提取法”主要指“介質電容法活性肽提取技術”，其特點是反應慢，生產量小，但是生產出來的肽類具有很高的活性。

如何在保證肽類活性的前提下從水母中提取出天然無毒的活性肽，是實現水母資源的高值化利用過程中需要解決的技術問題。

發明內容

為了解決上述技術問題，本發明提供了一種制備天然低分子量水母抗氧化活性肽的方法。

本發明解決其技術問題采用的技術方案為：一種制備天然低分子量水母抗氧化活性肽的方法，包括：

（1）將稱量的水母勻漿絞碎；

（2）在低溫條件下離心收集上清液；

（3）用膜截留分子量為3,000 Da的超濾管，將步驟（2）中制備的上清液在低溫條件下離心收集濾出液；

（4）將收集的濾出液冷凍干燥。

作為本發明的一種優選方式，步驟（1）中，在絞碎的水母中加入1-3倍的重量/體積比的磷酸緩沖液（PBS），2-6℃下超聲破碎10-20 min。

進一步優選地，磷酸緩沖液為20-50 mM，pH6.0-8.0，含0.1-0.2M NaCl。

進一步優選地，步驟（2）中，轉速10,000-12,000 rpm，離心10-30min。

進一步優選地，步驟（3）中，轉速5,000-7,000 rpm離心30-60 min。

進一步優選地，所述的水母為新鮮水母或置于-80~-20℃的低溫下保存的冷凍水母。