[發明專利]用于鳙遺傳多樣性分析的雙重PCR微衛星引物及應用有效
| 申請號: | 202110790773.4 | 申請日: | 2021-07-13 |
| 公開(公告)號: | CN113621711B | 公開(公告)日: | 2023-09-22 |
| 發明(設計)人: | 陶敏;黃強;李紅濤;湯婷;陳仁峰;張宏;劉長明;彭海波;楊俊鋒;李想;宋江騰 | 申請(專利權)人: | 武漢中科瑞華生態科技股份有限公司;四川省能投攀枝花水電開發有限公司;湖北省長江水生態保護研究院 |
| 主分類號: | C12Q1/6888 | 分類號: | C12Q1/6888;C12Q1/686;C12N15/11 |
| 代理公司: | 武漢宇晨專利事務所(普通合伙) 42001 | 代理人: | 余曉雪 |
| 地址: | 430077 湖北省武漢市武*** | 國省代碼: | 湖北;42 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 用于 遺傳 多樣性 分析 雙重 pcr 衛星 引物 應用 | ||
1.一種用于鳙遺傳多樣性分析的雙重PCR微衛星引物,其特征在于:包括如下4組引物序列:
2.一種基于如權利要求1所述的用于鳙遺傳多樣性分析的雙重PCR微衛星引物對鳙遺傳多樣性進行分析的方法,其特征在于:所述方法包括如下步驟:
1)取鳙組織樣品并從鳙組織樣品中提取鳙樣品DNA;
2)利用如權利要求1所述的用于鳙遺傳多樣性分析的雙重PCR微衛星引物對鳙樣品DNA進行PCR擴增;
3)把步驟2)得到的PCR擴增產物在10%的聚丙烯酰胺凝膠上進行電泳分離,根據分離結果統計每個個體在所有微衛星位點中PCR擴增產物的基因型,根據各個個體的基因分型結果進行遺傳多樣性分析。
3.根據權利要求2所述的方法,其特征在于:所述步驟2)中的PCR反應體系是25ul:10×PCR?Buffer?2.5ul,2.5mmol/L?dNTP?0.5ul,2mmol/L?MgCl2?1.5ul,Taq酶0.4ul,DNA模板3ul,超純水13.1ul以及每組反應體系兩對引物的上下游引物各1ul。
4.根據權利要求3所述的方法,其特征在于:所述步驟2)中的PCR反應程序為:95℃預變性3min;95℃變性30s,退火溫度57℃復性30s,72℃延伸30s,30個循環;72℃延伸10min;4℃保存。
5.根據權利要求4所述的方法,其特征在于:所述步驟3)中是將步驟2)得到的PCR擴增產物用10%的非變性聚丙烯酰胺凝膠進行電泳分離。
6.如權利要求1所述的用于鳙遺傳多樣性分析的雙重PCR微衛星引物在鳙的遺傳多樣性檢測時的應用。
7.如權利要求1所述的用于鳙遺傳多樣性分析的雙重PCR微衛星引物在鳙個體識別時的應用。
8.如權利要求1所述的用于鳙遺傳多樣性分析的雙重PCR微衛星引物在計算鳙個體之間親緣關系的遠近時的應用。
9.如權利要求1所述的用于鳙遺傳多樣性分析的雙重PCR微衛星引物在鳙選育時的應用。
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