[發明專利]γ-氨基丁酸誘導培養擬粉紅鎖擲孢酵母Y16對葡萄采后病害防治的方法

有效

• 申請號: 202110790681.6
• 申請日: 2021-07-13
• 公開（公告）號: CN113549559B
• 公開（公告）日: 2022-07-22
• 發明（設計）人: 張紅印;許美秋;趙利娜;肖金瑋;張曉云;楊其亞;王凱利
• 申請（專利權）人: 江蘇大學
• 主分類號: C12N1/16
• 分類號: C12N1/16;A23B7/155;C12R1/645
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本發明屬于生物防治技術領域，具體涉及γ?氨基丁酸誘導培養擬粉紅鎖擲孢酵母Y16對葡萄采后病害防治的方法；步驟為：將酵母活化培養后，接種到添加有γ?氨基丁酸的NYDB培養基中進行誘導培養，離心得到菌體，用無菌水稀釋為1×10⁸cells/mL的菌懸液；在葡萄表面打孔后注入菌懸液，2h后注入等體積的塔賓曲霉孢子懸浮液，實現對塔賓曲霉的有效控制；或者直接將菌懸液均勻噴灑在葡萄表面，自然晾干，即可實現葡萄采后病害的防治和貯藏保鮮的用途；本發明可以有效控制葡萄采后由塔賓曲霉引起的病害和自然腐爛，同時對葡萄采后主要品質指標無不良顯著影響，操作方便且安全環保，具有顯著的經濟效益和社會效益。

技術領域

本發明屬于水果采后病害生物防治技術領域，具體涉及γ-氨基丁酸誘導培養擬粉紅鎖擲孢酵母Y16對葡萄采后病害防治的方法。

背景技術

葡萄(Vitis vinifera L.)是世界上消費最多的水果之一。它們具有很高的營養價值，如多種多樣的氨基酸、糖、有機酸和維生素，深受消費者的喜愛。我國葡萄的種植面積廣而且品種齊全，主要用于釀造葡萄酒，制作果酒、果醬和蜜餞等，具有很大的經濟開發價值和廣闊的市場遠景。然而，在采后、貯藏及銷售期間，由于機械擠壓和病菌侵染，極易發生果粒腐爛現象，使其失去商品價值，直接給相關從業人員造成巨大的經濟損失。葡萄采后病害主要有因果實衰老、環境溫度、二氧化硫損傷等引起的果肉褐變、裂果、凍害等生理性病害，以及由青霉屬、曲霉屬、根霉屬的真菌侵染引起的灰霉病、青腐病、根霉病、黑斑病、黑粉病等侵染性病害。Merlera(2015)等報道，塔賓曲霉(Aspergillus tubingensis)，黑曲霉群菌種的其中一種，是葡萄采后主要致病菌之一。Medina(2005)等研究發現，塔賓曲霉對葡萄具有很強的致病能力，且侵染葡萄會產生赭曲霉毒素A(OTA)。赭曲霉毒素A是一種普遍存在的真菌毒素，對動物具有腎毒性、肝毒性、致畸毒性和免疫毒性。更為嚴重的是，赭曲霉毒素A不僅存在于葡萄中，還存在于葡萄制品中，如葡萄酒，不僅危害人體健康，而且給葡萄及其制品的產業帶來極大的問題，造成巨大的經濟損失。赭曲霉毒素A污染已被確定為一個世界性問題，歐盟委員會已經對某些食品中的赭曲霉毒素A設定了最大允許限量。

目前針對水果采后病害的控制方法主要有物理方法、化學方法、和生物防治法。目前，最常用的控制方法是化學殺菌劑，因其價格便宜、效率高、方便等優點，然而，長期使用化學殺菌劑會使病原菌產生耐藥性，危害環境及人體健康，使其應用受到極大的限制。物理方法主要包括冷藏、熱處理(熱水處理和熱空氣處理)、輻射等，可不同程度地抑制病原菌的活性與毒素積累，但因設備成本高、工業化難度大且處理不當可能會造成水果的理化性質與感官品質發生不良變化等問題導致其在實際應用上存在較大的局限性。生物防治法是利用拮抗微生物(細菌、霉菌和酵母菌)來控制水果的采后病害，與物理方法、化學方法相比，其安全無害、無副作用且具有良好的防治作用。拮抗酵母菌與其它拮抗微生物相比，具有可快速增殖、不產生抗生素、不產生真菌毒素、遺傳穩定且安全性高等優點。部分拮抗酵母不僅對水果采后病害有良好的防治作用，還可以對病原菌產生的毒素進行降解，對生物防治的大規模實際應用有重大意義。但是與化學殺菌劑相比，拮抗微生物的防治效率較低，如何提升生防效力是亟需解決的問題。

γ-氨基丁酸(GABA)，白色或近白色結晶性粉末，是一種天然的非蛋白氨基酸，廣泛分布于動植物、微生物體中。目前γ-氨基丁酸的生產工藝主要是植物富集法和微生物法，具有條件溫和、安全性高、可控性好等優點，并已被廣泛應用于食品行業。但在生物防治領域，尤其是在葡萄采后病害的生物防治方面，目前未見有相關報道。

發明內容

本發明的目的是利用γ-氨基丁酸誘導培養擬粉紅鎖擲孢酵母Y16(Sporidiobolus pararoseus Y16)提高其對葡萄采后病害的生防效力，減少采后病害造成的損失，具有潛在的應用價值。

為了實現以上目的，本發明提供方案如下：