[發明專利]γ-氨基丁酸誘導培養擬粉紅鎖擲孢酵母Y16對葡萄采后病害防治的方法

有效

• 申請號: 202110790681.6
• 申請日: 2021-07-13
• 公開（公告）號: CN113549559B
• 公開（公告）日: 2022-07-22
• 發明（設計）人: 張紅印;許美秋;趙利娜;肖金瑋;張曉云;楊其亞;王凱利
• 申請（專利權）人: 江蘇大學
• 主分類號: C12N1/16
• 分類號: C12N1/16;A23B7/155;C12R1/645
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.γ-氨基丁酸誘導培養擬粉紅鎖擲孢酵母Y16對葡萄采后病害防治的方法，其特征在于，具體步驟如下：

將擬粉紅鎖擲孢酵母Y16于NYDB培養基中進行活化培養，得到活化培養液；然后再取NYDB培養基 ，添加γ-氨基丁酸得到混合培養液；將活化培養液接種于混合培養液中進行誘導培養，培養后經離心得到菌體沉淀，將菌體沉淀用無菌水洗滌數次后，稀釋制備成1×10⁸cells/mL的酵母菌懸液；在葡萄表面用無菌打孔器進行打孔，然后在每孔分別注入一定體積的酵母菌懸液，一段時間后再于每孔接種與酵母菌懸液等體積的塔賓曲霉孢子懸浮液，其濃度為1×10⁵spores/mL，實現對塔賓曲霉引起葡萄病害的有效防治；

或者不對葡萄進行處理，保持葡萄的自然狀況放入塑料筐中，將誘導培養后稀釋制備的酵母菌懸液均勻噴灑于葡萄表面，待葡萄自然風干后放入保鮮袋中，再置于塑料筐中，用保鮮膜密封后，于室溫下存放，即可實現對葡萄采后病害的防治及貯藏保鮮；

所述的擬粉紅鎖擲孢酵母Y16具體為擬粉紅鎖擲孢酵母(Sporidiobolus pararoseus)Y16，保藏于中國普通微生物菌種保藏管理中心，保藏編號為：CGMCC No.2.5351。

2.根據權利要求1所述γ-氨基丁酸誘導培養擬粉紅鎖擲孢酵母Y16對葡萄采后病害防治的方法，其特征在于，所述γ-氨基丁酸在混合培養液中的質量濃度為0.05％-1.6％。

3.根據權利要求1所述γ-氨基丁酸誘導培養擬粉紅鎖擲孢酵母Y16對葡萄采后病害防治的方法，其特征在于，所述的NYDB培養基的組分為，以1L計：酵母膏5g，葡萄糖10g，牛肉浸膏8g，蒸餾水定容至1000mL，pH自然，115℃滅菌20min。

4.根據權利要求1所述γ-氨基丁酸誘導培養擬粉紅鎖擲孢酵母Y16對葡萄采后病害防治的方法，其特征在于，其中，所述活化培養液 接種于混合培養液的接種體積比為1-2:100。

5.根據權利要求1所述γ-氨基丁酸誘導培養擬粉紅鎖擲孢酵母Y16對葡萄采后病害防治的方法，其特征在于，所述活化培養和誘導培養的條件均為：溫度28℃，轉速180～200rpm，時間20～24h。

6.根據權利要求1所述γ-氨基丁酸誘導培養擬粉紅鎖擲孢酵母Y16對葡萄采后病害防治的方法，其特征在于，所述離心的條件為：離心力為8000g，時間10～15min。

7.根據權利要求1所述γ-氨基丁酸誘導培養擬粉紅鎖擲孢酵母Y16對葡萄采后病害防治的方法，其特征在于，所述打孔的孔直徑3mm，深度3mm；所述一段時間為2h。

8.根據權利要求1所述γ-氨基丁酸誘導培養擬粉紅鎖擲孢酵母Y16對葡萄采后病害防治的方法，其特征在于，所述在孔中注入酵母菌懸液和塔賓曲霉孢子懸浮液的體積均為10μL。