[發明專利]一種靶向肥大細胞MrgX2小分子熒光探針及制備方法和應用

有效

• 申請號: 202110790653.4
• 申請日: 2021-07-13
• 公開（公告）號: CN113402523B
• 公開（公告）日: 2022-07-12
• 發明（設計）人: 賀懷貞;王程;賀浪沖;侯亞靜;呂悅馨
• 申請（專利權）人: 西安交通大學
• 主分類號: C07D487/04
• 分類號: C07D487/04;C09K11/06;G01N33/53;G01N33/74;G01N21/64
• 代理公司: 西安通大專利代理有限責任公司 61200
• 代理人: 安彥彥

1.一種靶向肥大細胞MrgX2受體的小分子熒光探針，其特征在于，該探針結構式為；

其中，R代表含有羧基的熒光發色團，n代表2～5；

所述的含有羧基的熒光發色團為香豆素類熒光發色團、熒光素類熒光發色團或氟化硼二吡咯醇酸；

香豆素類熒光發色團、熒光素類熒光發色團與氟化硼二吡咯醇酸構式如下：

其中，R₁為氫原子、甲氧基或氮烷基；R₂、R₃為氯原子、溴原子或氟原子。

2.一種靶向肥大細胞MrgX2受體的小分子熒光探針的制備方法，其特征在于，按照氨基取代的2～5個不同碳鏈長度的苯基取代的吡唑并嘧啶類衍生物∶熒光發色團∶丙基磷酸酐＝1∶1∶1的摩爾比，將氨基取代的2～5個不同碳鏈長度的苯基取代的吡唑并嘧啶類衍生物、含有羧基的熒光發色團以及丙基磷酸酐加入到DCM中進行反應，得到熒光探針；該熒光探針的結構式如下：

其中，R代表含有羧基的熒光發色團，n代表2～5；

所述的含有羧基的熒光發色團為香豆素類熒光發色團、熒光素類熒光發色團或氟化硼二吡咯醇酸；

香豆素類熒光發色團、熒光素類熒光發色團與氟化硼二吡咯醇酸構式如下：

其中，R₁為氫原子、甲氧基或氮烷基；R₂、R₃為氯原子、溴原子或氟原子。

3.根據權利要求2所述的一種靶向肥大細胞MrgX2受體的小分子熒光探針的制備方法，其特征在于，氨基取代的2～5個不同碳鏈長度的苯基取代的吡唑并嘧啶類衍生物通過以下過程制得：

1)將甲氧基取代的苯基取代的吡唑并嘧啶類衍生物溶于DDM后，加入三溴化硼，去甲基后得到(R)-4-(7-(3-(二甲基氨基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-基)苯酚；

2)向(R)-4-(7-(3-(二甲基氨基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-基)苯酚中加入叔丁基(溴乙基)氨基甲酸酯、叔丁基(溴丙基)氨基甲酸酯、叔丁基(溴丁基)氨基甲酸酯或叔丁基(溴戊基)氨基甲酸酯進行反應，得到末端為叔丁基氨基甲酸酯取代的2～5個不同碳鏈長度的苯基取代的吡唑并嘧啶類衍生物；

3)將末端為叔丁基氨基甲酸酯取代的2～5個不同碳鏈長度的苯基取代的吡唑并嘧啶類衍生物在鹽酸中，以乙酸乙酯為溶劑，脫去氨基保護，得到氨基取代的2～5個不同碳鏈長度的苯基取代的吡唑并嘧啶類衍生物。

4.根據權利要求3所述的一種靶向肥大細胞MrgX2受體的小分子熒光探針的制備方法，其特征在于，甲氧基取代的苯基取代的吡唑并嘧啶類衍生物通過以下過程制得：

1)4-甲氧基苯甲酰乙酰乙酯與3-氨基吡唑在乙酸溶液中反應，得到5-(4-甲氧基苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-7(4H)-酮；

2)以POCl₃為氯代試劑，取代5-(4-甲氧基苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-7(4H)-酮的羰基，得到7-氯-5-(4-甲氧基苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶；

3)將7-氯-5-(4-甲氧基苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶溶解于二氧六環，加入DIEA后與(R)-3-(二甲基氨基)吡咯烷反應，得到甲氧基取代的苯基取代的吡唑并嘧啶類衍生物。

5.一種如權利要求1所述的靶向肥大細胞MrgX2受體的小分子熒光探針在制備靶向識別肥大細胞MrgX2制劑中的應用。

6.根據權利要求5所述的應用，其特征在于，靶向肥大細胞MrgX2受體的小分子熒光探針在用于MrgX2競爭性配體篩選中的應用。