[發(fā)明專利]一種基于自組裝的表面展示氟化酶的方法在審
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 202110789583.0 | 申請(qǐng)日: | 2021-07-13 |
| 公開(公告)號(hào): | CN113355343A | 公開(公告)日: | 2021-09-07 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | 周景文;楊文涵;余世琴;堵國成;陳堅(jiān) | 申請(qǐng)(專利權(quán))人: | 江南大學(xué) |
| 主分類號(hào): | C12N15/70 | 分類號(hào): | C12N15/70;C12N15/62;C12N1/21;C12N9/10;C12R1/19 |
| 代理公司: | 哈爾濱市陽光惠遠(yuǎn)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 23211 | 代理人: | 趙巧娜 |
| 地址: | 214000 江蘇*** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
| 權(quán)利要求書: | 查看更多 | 說明書: | 查看更多 |
| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 一種 基于 組裝 表面 展示 氟化 方法 | ||
1.一種自組裝表面展示的系統(tǒng),其特征在于,所述系統(tǒng)由質(zhì)粒A和質(zhì)粒B組成;
所述質(zhì)粒A上表達(dá)錨定蛋白和SpyCatcher;
所述質(zhì)粒B上表達(dá)目的蛋白和SpyTag。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的系統(tǒng),其特征在于,所述錨定蛋白包括Lpp-OmpA。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的系統(tǒng),其特征在于,所述質(zhì)粒A上還含有鼠李糖誘導(dǎo)型啟動(dòng)子;所述質(zhì)粒A上的RBS序列如SEQ ID NO.1所示。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的系統(tǒng),其特征在于,所述Lpp-OmpA的核苷酸序列如SEQ IDNO.3所示。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的系統(tǒng),其特征在于,所述SpyCatcher的核苷酸列如SEQ IDNO.4所示。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的系統(tǒng),其特征在于,所述SpyTag的核苷酸列如SEQ ID NO.5所示。
7.一種在大腸桿菌表面展示氟化酶的方法,其特征在于,將權(quán)利要求1-6任一項(xiàng)所述系統(tǒng)轉(zhuǎn)入宿主細(xì)胞中,構(gòu)建得到重組菌,將重組菌培養(yǎng)并進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)產(chǎn)酶。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法,其特征在于,所述宿主細(xì)胞包括大腸桿菌。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法,其特征在于,編碼所述氟化酶的核苷酸列如SEQ IDNO.2所示。
10.權(quán)利要求1-6任一所述系統(tǒng),或權(quán)利要求7-9任一所述方法在表面展示目的蛋白中的應(yīng)用。
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