[發明專利]一種海洋鏈霉菌磷脂酶D突變體和應用

有效

• 申請號: 202110785800.9
• 申請日: 2021-07-12
• 公開（公告）號: CN113604453B
• 公開（公告）日: 2023-06-16
• 發明（設計）人: 王永華;王方華;胡榮康;藍東明;楊博
• 申請（專利權）人: 華南理工大學
• 主分類號: C12N9/16
• 分類號: C12N9/16;C12N15/55;C12N15/70;C12N1/21;C12P13/06;C12R1/19
• 代理公司: 廣州市華學知識產權代理有限公司 44245
• 代理人: 宮愛鵬

1.一種海洋鏈霉菌磷脂酶D突變體，其特征在于，所述的磷脂酶D突變體的氨基酸序列為SEQID?NO:2、SEQID?NO:4、SEQID?NO:5或SEQID?NO:6。

2.一種編碼權利要求1所述磷脂酶D突變體的基因，其特征在于，如SEQID?NO:2所示磷脂酶D突變體的編碼基因為SEQID?NO:8，如SEQID?NO:4所示磷脂酶D突變體的編碼基因為SEQID?NO:10，如SEQID?NO:5所示磷脂酶D突變體的編碼基因為SEQID?NO:11，或如SEQIDNO:6所示磷脂酶D突變體的編碼基因為SEQID?NO:12。

3.一種含權利要求2所述基因的重組基因工程菌。

4.權利要求3所述重組基因工程菌的制備方法，其特征在于，將權利要求2所述基因克隆到表達載體pET-21a、pET-28a或pET-32a上，轉化大腸桿菌SHuffle?T7感受態細胞，獲得重組基因工程菌。

5.權利要求1所述磷脂酶D突變體的應用，其特征在于，所述的磷脂酶D突變體用于生產磷脂酰絲氨酸，將L-絲氨酸加入磷脂酶D突變體的酶液中，大豆卵磷脂加入有機溶劑中，混合后于40±5℃振蕩培養12±4h；所述有機溶劑與酶液的體積比為?4：1-4，有機溶劑為乙醚。

6.根據權利要求5所述的應用，其特征在于，所述磷脂酶D突變體的酶液為磷脂酶D突變體加入Tris-HCl緩沖液，pH為8。