[發明專利]子宮內膜來源的外分泌體miRNA在胚胎著床中的應用

在審

• 申請號: 202110761587.8
• 申請日: 2021-07-06
• 公開（公告）號: CN113584180A
• 公開（公告）日: 2021-11-02
• 發明（設計）人: 王爭光;韓強;陳愷宇;陳曦
• 申請（專利權）人: 浙江大學
• 主分類號: C12Q1/6888
• 分類號: C12Q1/6888;C12N15/113
• 代理公司: 杭州橙知果專利代理事務所(特殊普通合伙) 33261
• 代理人: 杜放

本發明公開了子宮內膜來源的外分泌體miRNA在胚胎著床中的應用，包括以下步驟：步驟A、小RNA測序：通過小白鼠固定裝置3將受孕小白鼠進行固定，之后對小白鼠進行處死；步驟B、分析受孕小白鼠妊娠miRNA的變化；步驟C、假孕模型驗證miRNA的作用功能；步驟D、延時著床模型與延時著床激活模型驗證miRNA的作用功能；步驟E、對miRNA作為抑制胚胎著床的藥物在小鼠體內進行效果探究；所述步驟A中的小白鼠自動固定設備包括固定裝置；所述固定裝置包括鼠腳拉平組件；通過設置了鼠腳拉平組件,對小白鼠的四肢進行固定，并向四周拉動四肢，從而使小白鼠處于趴下的狀態，使小白鼠無法進行掙脫從而提高對子宮內膜來源的外分泌體miRNA效果測試的準確性。

技術領域

本發明屬于miRNA應用技術領域，尤其是涉及子宮內膜來源的外分泌體miRNA在胚胎著床中的應用。

背景技術

miRNA在機體內的脾臟、腎臟及肝臟中具有較高的表達量。近期，有研究表明，人源的miRNA與鼠源的miRNA的一致性達到了100％，因此可以選擇小鼠為模式動物，進行miRNA對胚胎著床影響的研究，開發抑制或促進胚胎著床的藥物；但是在現有的實驗中需要對小白鼠進行固定，之后在小白鼠體內進行提取相應的實驗物，但是在提取過程需要用手對小白鼠進行固定，由于人的手大小不一，所以不能保證每一個實驗人員都可以很好的將小白鼠固定住，從而會影響對小白鼠進行取樣的穩定性，之后小白鼠本身也難以對其進行固定，從而會使小白鼠固定的效果不好，從而在取樣時會導致取樣數據不準確的現象。

發明內容

本發明為了克服現有技術的不足，提供一種在子宮內膜來源的外分泌體miRNA試驗的過程中可以更好的將小白鼠進行固定，提高外分泌體miRNA效果的測試穩定性和準確性的子宮內膜來源的外分泌體miRNA在胚胎著床中的應用。

為了實現上述目的，本發明采用以下技術方案：子宮內膜來源的外分泌體miRNA在胚胎著床中的應用，包括以下步驟：

步驟A、小RNA測序：選取發情的母鼠與公鼠進行合籠，母鼠受孕，之后通過小白鼠自動固定設備將受孕小白鼠進行固定，之后對小白鼠進行處死，以及提取組織miRNA；對測序結果找出在著床窗口期起關鍵作用的miRNA，在胚胎著床過程中，主要觀察mmu-miR-192-5p在著床前后的變化；

步驟B、分析受孕小白鼠妊娠miRNA的變化；主要對第一天到第七天的miR-192-5p的變化趨勢進行記錄和分析。

步驟C、假孕模型驗證miRNA的作用功能；在假孕模型中，在沒有胚胎存在的情況下，與妊娠第一天相比，子宮內膜中mmu-miR-192-5p出現的現象變化；

步驟D、延時著床模型與延時著床激活模型驗證miRNA的作用功能；對延時模型與延時激活模型的數據結果進行分析，主要證實在胚胎著床時，著床事件是導致mmu-miR-192-5p發生變化的原因

步驟E、對miRNA作為抑制胚胎著床的藥物在小鼠體內進行效果探究。。