[發明專利]子宮內膜來源的外分泌體miRNA在胚胎著床中的應用

在審

• 申請號: 202110761587.8
• 申請日: 2021-07-06
• 公開（公告）號: CN113584180A
• 公開（公告）日: 2021-11-02
• 發明（設計）人: 王爭光;韓強;陳愷宇;陳曦
• 申請（專利權）人: 浙江大學
• 主分類號: C12Q1/6888
• 分類號: C12Q1/6888;C12N15/113
• 代理公司: 杭州橙知果專利代理事務所(特殊普通合伙) 33261
• 代理人: 杜放

1.子宮內膜來源的外分泌體miRNA在胚胎著床中的應用，其特征在于包括以下步驟：

步驟A、小RNA測序：選取發情的母鼠與公鼠進行合籠，母鼠受孕，之后通過小白鼠自動固定設備將受孕小白鼠進行固定，之后對小白鼠進行處死，以及提取組織miRNA；對測序結果找出在著床窗口期起關鍵作用的miRNA，在胚胎著床過程中，主要觀察mmu-miR-192-5p在著床前后的變化；

步驟B、分析受孕小白鼠妊娠miRNA的變化；主要對第一天到第七天的miR-192-5p的變化趨勢進行記錄和分析。

步驟C、假孕模型驗證miRNA的作用功能；在假孕模型中，在沒有胚胎存在的情況下，與妊娠第一天相比，子宮內膜中mmu-miR-192-5p出現的現象變化；

步驟D、延時著床模型與延時著床激活模型驗證miRNA的作用功能；對延時模型與延時激活模型的數據結果進行分析，主要證實在胚胎著床時，著床事件是導致mmu-miR-192-5p發生變化的原因

步驟E、對miRNA作為抑制胚胎著床的藥物在小鼠體內進行效果探究。

所述步驟A中的小白鼠自動固定設備包括第一支撐架(1)、設于第一支撐架(1)上方用于關住小白鼠的鼠籠(2)、設于鼠籠(2)鼠籠(2)上用于控制小白鼠出入的籠門、設于鼠籠(2)側面用于控制小白鼠離開鼠籠(2)后不會跑偏的第一擋板(21)、設于第一擋板(21)端部冰位于第一支撐架(1)上用于控制小白鼠陷下去的擋門裝置(4)、設于擋門裝置(4)下方用于對小白鼠進行固定好位置的固定裝置(3)；所述固定裝置(3)包括固定設于第一支撐架(1)下方用于盛放小白鼠的第一箱體(31)、設于第一箱體(31)中的用于使小白鼠上下運動的升降板(32)、設于第一箱體(31)下方用于驅動升降板(32)的氣缸(311)、設于升降板(32)上用于固定小白鼠四肢的鼠腳拉平組件(33)、設于第一箱體(31)兩側用于配合升降板(32)驅動鼠腳拉平組件(33)的兩個第一控制組件(34)、設于第一箱體(31)兩側并位于第一控制組件(34)上方用于控制第一控制組件(34)不對鼠腳拉平組件(33)進行驅動的兩個第二控制組件(35)、設于升降板(32)上方并位于第一箱體(31)內部兩側位置用于壓住小白鼠的兩個第一固定板(36)、設于第一箱體(31)兩側并連接于兩個第一固定板(36)用于配合第一控制組件(34)控制第一固定板(36)向第一箱體(31)中間位置進行運動的第三控制組件(37)、設于第一箱體(31)兩側并位于第三控制組件(37)上方用于控制第一固定板(36)上下運動的第四控制組件(39)、設于升降板(32)上位于小白鼠頸部的殺鼠組件(38)；所述鼠腳拉平組件(33)包括連接于第一控制組件(34)的兩個第一導向桿(331)、滑動設于第一導向桿(331)上的兩個第一導向塊(332)、設于第一導向塊(332)上并連接于升降板(32)用于控制第一導向塊(332)在第一導向桿(331)上進行滑動的擺動結構(333)、設于升降板(32)上用于卡住小白鼠的兩個第三擋板(334)、設于第三擋板(334)上用于與擺動結構(333)避位的第二避位槽(335)、設于第一導向塊(332)上用于夾緊小白鼠四肢的自動夾緊結構(336)、設于升降板(32)上用于與擺動結構(333)配合的限位桿件(337)；在使用該設備時，小白鼠從鼠籠(2)中出來，順著第一擋板(21)到達擋門裝置(4)處，之后會落到升降板(32)上方，被第一控制組件(34)卡住位置，使其無法旋轉方向，之后氣缸(311)帶動升降板(32)向上進行運動，升降板(32)向上運動時與第一控制組件(34)配合帶動第一導向桿(331)向第一箱體(31)的兩側方向進行運動，之后第一導向桿(331)會帶動第一導向塊(332)一起進行運動，之后第一導向塊(332)會在擺動結構(333)的作用下向第一導向桿(331)的兩側方向進行運動，第一導向塊(332)會帶動自動夾緊結構(336)進行運動，自動夾緊結構(336)會將小白鼠的四肢夾緊并向小白鼠的四周拉伸，使小白鼠趴在升降板(32)上，擺動結構(333)運動時會與限位桿件(337)配合，在自動夾緊結構(336)夾緊小白鼠的四肢向四周拉伸之前自動夾緊結構(336)會壓在小白鼠上，向四周拉伸之后第一控制組件(34)會和第二控制組件(35)進行配合，從而使第一導向桿(331)和第一導向塊(332)不再進行運動，這時第一固定板(36)已經壓好小白鼠，第一固定板(36)會在第四控制組件(39)的作用下帶動第一固定板(36)和第三控制組件(37)一起向上進行運動。