[發(fā)明專利]表達(dá)牛病毒性腹瀉E2基因的重組牛結(jié)節(jié)疹病毒及其應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110760588.0
• 申請(qǐng)日: 2021-07-06
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN113388587B
• 公開(kāi)（公告）日: 2023-09-26
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 賀筍;李俊輝;潘毅平;趙毅;程蘭玲;張偉;王雨朦;霍新亮;高揚(yáng)毅;王馬軍
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 天康制藥股份有限公司
• 主分類號(hào): C12N7/01
• 分類號(hào): C12N7/01;C12N15/40;C12N15/63;A61K39/275;A61K39/12;A61P31/14;A61P31/20
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

1.?一種預(yù)防牛結(jié)節(jié)疹和牛病毒性腹瀉二聯(lián)疫苗，其特征在于，活性成分為重組牛結(jié)節(jié)疹病毒；所述重組牛結(jié)節(jié)疹病毒為含有牛病毒性腹瀉E2基因的牛結(jié)節(jié)疹病毒；所述牛病毒性腹瀉E2基因的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.1所示，所述牛病毒性腹瀉E2基因插入在牛結(jié)節(jié)疹病毒的TK基因中；

所述牛病毒性腹瀉E2基因連有第一啟動(dòng)子。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的疫苗，其特征在于，所述第一啟動(dòng)子選自p7.5或p11。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的疫苗，其特征在于，所述牛結(jié)節(jié)疹病毒的TK基因中還插入有標(biāo)記基因，標(biāo)記基因連有第二啟動(dòng)子。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的疫苗，其特征在于，所述第二啟動(dòng)子選自p7.5或p11。

5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的疫苗，其特征在于，標(biāo)記基因選自EGFP、gpt或LacZ。

6.?根據(jù)權(quán)利要求1所述的疫苗，其特征在于，所述重組牛結(jié)節(jié)疹病毒的制備方法為將含有SEQ?ID?NO.1的轉(zhuǎn)移載體質(zhì)粒導(dǎo)入感染牛結(jié)節(jié)疹病毒的細(xì)胞中，培養(yǎng)篩選得到所述重組牛結(jié)節(jié)疹病毒。

7.?根據(jù)權(quán)利要求6所述的疫苗，其特征在于，轉(zhuǎn)移載體質(zhì)粒為pSP72或pBluescript?IISK(-)。

8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的疫苗，其特征在于，細(xì)胞為羊睪丸細(xì)胞。

9.根據(jù)權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)所述的疫苗，其特征在于，所述重組牛結(jié)節(jié)疹病毒的培養(yǎng)方法為利用VERO細(xì)胞懸浮培養(yǎng)。

10.權(quán)利要求1所述疫苗的制備方法，其特征在于，將重組牛結(jié)節(jié)疹病毒稀釋得到所述疫苗。

11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的制備方法，其特征在于，采用生理鹽水進(jìn)行稀釋。