[發(fā)明專利]一種靶向賴氨酰氧化酶1的嵌合抗原受體及其用途

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110752178.1
• 申請(qǐng)日: 2021-07-02
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN113321743B
• 公開(kāi)（公告）日: 2022-10-21
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 代小勇;蘇明
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 海南精準(zhǔn)醫(yī)療科技有限公司
• 主分類號(hào): C07K19/00
• 分類號(hào): C07K19/00;C12N15/13;C12N5/10;C12N15/867;A61K39/00;A61P35/00
• 代理公司: 北京市誠(chéng)輝律師事務(wù)所 11430
• 代理人: 范盈;李玉娜

本發(fā)明涉及靶向賴氨酰氧化酶1的嵌合抗原受體及其用途，具體提供給了一種分離的嵌合抗原受體，其包含抗賴氨酰氧化酶1的結(jié)合結(jié)構(gòu)域、跨膜結(jié)構(gòu)域以及細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)結(jié)構(gòu)域，所述抗賴氨酰氧化酶1的結(jié)合結(jié)構(gòu)域?yàn)榘劓溈勺儏^(qū)和輕鏈可變區(qū)，所述重鏈可變區(qū)包含重鏈互補(bǔ)決定區(qū)1?3，所述輕鏈可變區(qū)包含輕鏈互補(bǔ)決定區(qū)1?3。本發(fā)明還提供了一種免疫效應(yīng)細(xì)胞，其包含本發(fā)明所述的嵌合抗原受體。本發(fā)明的免疫效應(yīng)細(xì)胞具有顯著抑制腫瘤的效果。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物技術(shù)和生物醫(yī)藥領(lǐng)域，具體的涉及一種靶向賴氨酰氧化酶1的嵌合抗原受體及其用途。

背景技術(shù)

1.1乳腺癌

乳腺癌是女性最常見(jiàn)的惡性腫瘤，其發(fā)病率在全球范圍內(nèi)居于惡性腫瘤首位，也是死亡率最高的惡性腫瘤之一。根據(jù)美國(guó)癌癥協(xié)會(huì)報(bào)道，2008年全球有超過(guò)138萬(wàn)女性罹患乳腺癌，占女性癌癥新發(fā)病例數(shù)的23％，有超過(guò)45萬(wàn)人死于乳腺癌，占癌癥死亡總?cè)藬?shù)的14％，且發(fā)達(dá)國(guó)家如西歐和北美等地區(qū)乳腺癌的發(fā)病率高于欠發(fā)達(dá)國(guó)家。2016年美國(guó)預(yù)計(jì)癌癥新發(fā)病例數(shù)約為168.5萬(wàn)，癌癥死亡例數(shù)為59.5萬(wàn)，其中乳腺癌是女性最常見(jiàn)的惡性腫瘤，新發(fā)病例約為24.6萬(wàn)，占女性惡性腫瘤總發(fā)病例的29％；約4.05萬(wàn)人死于該病，占女性癌癥死亡人數(shù)的14％。而在我國(guó)，乳腺癌的發(fā)病率近年來(lái)呈明顯上升趨勢(shì)。在1998年至2007年間，城市婦女和農(nóng)村婦女的乳腺癌發(fā)病率年增長(zhǎng)分別為3.9％和6.3％。根據(jù)中國(guó)抗癌協(xié)會(huì)公布的統(tǒng)計(jì)數(shù)字顯示，我國(guó)每年新發(fā)乳腺癌病例約21萬(wàn)，發(fā)病率以每年3％的速度遞增，在北京、上海、天津、廣州等大城市已位居首位。從1991年至2000年間，我國(guó)乳腺癌患者死亡率增長(zhǎng)了38.9％，成為死亡率增長(zhǎng)最快的惡性腫瘤，已然成為了婦女健康的最大威脅。

乳腺癌早已是一種公認(rèn)的全身性疾病，治療主要是系統(tǒng)性的多學(xué)科綜合治療，包括手術(shù)治療、輔助放化療、生物靶向治療及內(nèi)分泌治療。隨著乳腺鉬靶X線攝片檢查的普及、外科手術(shù)新技術(shù)的開(kāi)展、放化療技術(shù)的更新以及生物靶向治療的推廣等，乳腺癌的治療已經(jīng)取得了巨大進(jìn)步，其治愈率得到了顯著改善。但由于乳腺癌是一種具有高度異質(zhì)性的惡性腫瘤，仍然使我們?cè)谥委熤忻媾R著很大的困難，即使是早期乳腺癌患者，仍約有30％的患者治療失敗、出現(xiàn)轉(zhuǎn)移。轉(zhuǎn)移是乳腺癌患者死亡的首要原因，一旦發(fā)生復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移，治愈率低于5％，預(yù)后不佳。因此，怎樣針對(duì)乳腺癌的復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移進(jìn)行有效的靶向治療，對(duì)提高乳腺癌患者生存率和生活質(zhì)量、改善預(yù)后具有重要實(shí)際意義。

1.2賴氨酰氧化酶(Lysyl Oxidase，LOX)

LOX是一種銅(Cu)依賴的氨基氧化酶，其基因位于人類常染色體5q23.1，由七個(gè)外顯子和六個(gè)內(nèi)含子組成。LOX是一種在細(xì)胞外基質(zhì)形成和修復(fù)過(guò)程中起著重要作用的基質(zhì)重塑酶，是細(xì)胞外基質(zhì)中膠原與彈力蛋白聚合起始階段穩(wěn)定細(xì)胞外基質(zhì)的關(guān)鍵酶。在Cu²⁺的輔助下，LOX能氧化細(xì)胞外基質(zhì)中的膠原蛋白和彈性蛋白上特殊的氨基酸殘基并使兩者形成共價(jià)交聯(lián)，調(diào)節(jié)組織的抗張強(qiáng)度、抵抗膠原酶的水解。LOX與配體結(jié)合后，在多種靶細(xì)胞內(nèi)發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)，包括調(diào)控細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)與基因轉(zhuǎn)錄，影響細(xì)胞運(yùn)動(dòng)遷移與細(xì)胞粘附等。

近年來(lái)，越來(lái)越多的學(xué)者通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)賴氨酰氧化酶1(LOX-1)與惡性腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。LOX-1在癌細(xì)胞中的過(guò)表達(dá)可促使其具有侵襲性，并可抗癌細(xì)胞失巢凋亡，增加其運(yùn)動(dòng)能力和侵襲性，而LOX-1反義寡核苷酸能夠抑制癌細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移能力。有研究發(fā)現(xiàn)，LOX-1蛋白在乳腺癌組織中的表達(dá)顯著高于癌旁正常乳腺組織及乳腺良性病變組織、在有腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的乳腺癌高于無(wú)腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者。韋薇等通過(guò)建立乳腺癌裸鼠原位移植瘤模型，接種轉(zhuǎn)染LOX-RNAi-LV的MDA-MB-231細(xì)胞于裸鼠，待成瘤后測(cè)量移植瘤的體積和質(zhì)量并進(jìn)行對(duì)比，發(fā)現(xiàn)干擾MDA-MB-231乳腺癌細(xì)胞中LOX-1的表達(dá)可抑制乳腺癌裸鼠移植瘤的生長(zhǎng)及侵襲。

1.3嵌合抗原受體T細(xì)胞免疫治療技術(shù)