[發明專利]一種用于診斷乳腺癌的雞尾酒免疫組化試劑盒

有效

• 申請號: 202110749985.8
• 申請日: 2021-07-02
• 公開（公告）號: CN113295871B
• 公開（公告）日: 2023-07-21
• 發明（設計）人: 陳鵬;李三華;牛銀銀;楊瀟燕;米貫勛;崔紅米;劉暢;齊華;劉文弟
• 申請（專利權）人: 河南賽諾特生物技術有限公司
• 主分類號: G01N33/577
• 分類號: G01N33/577;G01N33/574;G01N33/68
• 代理公司: 鄭州睿信知識產權代理有限公司 41119
• 代理人: 郭佳效

本發明涉及一種用于診斷乳腺癌的雞尾酒免疫組化試劑盒，包含過氧化物酶封閉劑、組合一抗、組合二抗、DAB顯色底物、DAB顯色緩沖液、快紅顯色劑、快紅顯色活化劑、快紅緩沖液以及蘇木素復染液，其中，所述組合一抗包括鼠抗人細胞角蛋白7單克隆抗體、鼠抗人P63單克隆抗體和兔抗人MHC單克隆抗體；所述組合二抗包括HRP標記的抗鼠二抗聚合物和AP標記的抗兔二抗聚合物。本發明的試劑盒采用雞尾酒組合一抗，能夠在同一張組織切片上同時檢測CK7、P63、MHC三種抗原靶標的表達情況，減少樣本使用量，避免不同張切片帶來的差異，解決微小組織樣本染色重復性差的問題，且能直觀鮮明的辨別正常組織和癌組織，為病理醫師提供更全面可靠的診斷依據，提高診斷精準度。

技術領域

本發明屬于生物醫學領域，具體涉及一種用于診斷乳腺癌的雞尾酒免疫組化試劑盒。

背景技術

乳腺癌是全球女性最常見的惡性腫瘤，據2018年統計數據顯示，全世界女性的乳腺癌發病率和死亡率分別為4.63‰和1.3‰，且呈現逐年上升的趨勢。中國由于人口基數的原因，我國女性乳腺癌的發病人數和死亡人數均在世界首位。因此乳腺癌的早診早治以及預防成為我國癌癥控制的重點方向。

很多研究表明，乳腺癌的發生與發展是一個多步驟過程，先由正常的上皮增生到不典型性增生再到原位癌繼而發展成浸潤性癌最終變成轉移癌。浸潤性乳腺癌的一個十分明顯的特征是肌上皮細胞層的缺失，當肌上皮細胞層這一保護屏障缺失后，癌細胞就很容易侵入間質及轉移，因此肌上皮細胞存在與否常常是區別乳腺良惡性病變的重要依據之一。但是在臨床上，從形態學上區分乳腺惡性病變中的原位癌與早期浸潤癌，尤其是微浸潤癌，始終是臨床病理診斷的難題，對于乳腺組織較小的穿刺標本更是困難。

目前，對乳腺癌的病理檢測主要依賴于免疫組織化學法(immunohistochemistry，IHC)，利用合適的免疫組化抗體來檢測抗原靶標，通過不同指標的表達情況來鑒別疾病的分型。該方法的缺點是：①單個樣本的染色切片數量多，需要判讀多張切片的染色結果，綜合分析，得到病理診斷結果；②IHC對取材樣本的大小要求高，而隨著技術的迭代發展，乳腺癌患者的腫瘤組織樣本變成小活檢或細針穿刺術，得到的石蠟塊只有有限的腫瘤含量。從這些有限的部分中，病理學實驗室必須制作對主要亞型進行診斷所必需的HE玻片(通常是兩個)以及支持該診斷的其他玻片，所以存在很大的弊端。

針對這種現象，免疫顯色試劑(雙染)問世，該產品的改進在于：①與抗體結合的酶標二抗聚合物是辣根過氧化物(HRP)標記的抗鼠二抗聚合物和堿性磷酸酶(AP)標記的抗兔二抗聚合物的組合試劑；②顯色劑有兩種，分別是兩種酶的顯色底物，呈現不同的顏色，棕色和紅色；③在同一張組織切片上可以呈現兩種顏色，標記至少2種抗原靶標。但是，該技術仍然存在一些問題，在同一張切片上檢測多個抗原靶標時，抗體試劑必須單個順次孵育，造成免疫組化試驗時間過長，技術操作工作量未減少，并且，試劑盒不包含抗體試劑。同時，該試劑僅可用于手工免疫組化試驗的操作，沒有實現自動化，也不利于日常的工作需要。

發明內容

本發明的目的在于提供一種用于診斷乳腺癌的雞尾酒免疫組化試劑盒，該試劑盒采用雞尾酒組合一抗，能夠在同一張組織切片上同時檢測CK7、P63、MHC三種抗原靶標的表達情況，為病理醫師提供更多診斷信息，提高診斷的精準度，同時解決微小組織樣本染色重復性差的問題。

為了實現上述目的，本發明采用以下技術方案：

本發明提供一種用于診斷乳腺癌的雞尾酒免疫組化試劑盒，包括過氧化物酶封閉劑、組合一抗、組合二抗、DAB顯色底物、DAB顯色緩沖液、快紅顯色劑、快紅顯色活化劑、快紅緩沖液以及蘇木素復染液，其中，所述組合一抗包括鼠抗人細胞角蛋白7單克隆抗體、鼠抗人P63單克隆抗體和兔抗人MHC單克隆抗體；所述組合二抗包括HRP標記的抗鼠二抗聚合物和AP標記的抗兔二抗聚合物。

優選的，所述組合一抗中鼠抗人細胞角蛋白7單克隆抗體克隆號為EP16,鼠抗人P63單克隆抗體克隆號為MyR1-P63,兔抗人MHC單克隆抗體克隆號為SMMS-1。