[發明專利]一種液相色譜串聯質譜法同時檢測保健食品中雄激素化合物的方法

有效

• 申請號: 202110744002.1
• 申請日: 2021-07-01
• 公開（公告）號: CN113311094B
• 公開（公告）日: 2022-05-10
• 發明（設計）人: 劉猛;李秀萍;李曉娜;宿艷;萬慧慧
• 申請（專利權）人: 大連理工大學
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/88
• 代理公司: 大連東方專利代理有限責任公司 21212
• 代理人: 周媛媛;李馨

1.一種液相色譜串聯質譜法同時檢測保健食品中雄激素化合物的方法，其特征在于，包括以下步驟：所述的雄激素化合物為1,4-雄烯二酮、17α-群勃龍、群勃龍、雄烯二酮、諾龍、勃地酮、17α-勃地酮、睪酮、甲睪酮和司坦唑醇；

(1)提取：

口服液：量取1mL待測口服液于離心管中，加入1μg/mL的同位素內標混合溶液50μL，加乙腈9mL，超聲混合10-15min；

片劑、膠囊：稱取1g試樣于離心管中，加入1μg/mL的同位素內標混合溶液50μL，加乙腈10mL，超聲混合10-15min；

所述同位素內標混合溶液為含有相同體積比的睪丸酮-D3和康力龍-D3混合液；

(2)渦旋離心萃取：樣品液渦旋混合后離心，取上層乙腈溶液，加熱氮吹濃縮，加乙腈定容；所述渦旋離心萃取過程：渦旋振蕩10-15min，在4℃-10℃下8000-10000r/min離心10-15min，取上層乙腈溶液于另一個試管中，在25℃-40℃水浴中氮吹后用乙腈定容至1mL；

(3)液相色譜串聯質譜檢測：定容后的溶液經有機濾膜過濾后，進行液相色譜串聯質譜檢測，繪制標準工作曲線，內標法定量，根據峰面積計算待測樣品中雄激素的濃度；

色譜條件為：采用X Bridge C₁₈柱分離，X Bridge C₁₈柱為150mm×2.1mm，5μm，流動相：A相0.1％甲酸乙腈；B相：0.1％甲酸水；柱溫25℃，進樣體積10μL，流速0.2mL/min；梯度洗脫：0～15min，90％B～0％B；15min～20min，0％B；20min～21min，0％B～90％B；21min～31min，90％B；

質譜條件為：ESI⁺電離模式；檢測方式：多反應監測MRM；鞘氣：40Unit；輔助氣：10Unit；蒸發器溫度：250℃；毛細管溫度：350℃；電噴霧電壓：2500V；

所述多反應監測MRM的參數為：

。

2.根據權利要求1所述液相色譜串聯質譜法同時檢測水產品中雄激素化合物的方法，其特征在于，步驟(1)所述同位素內標混合溶液為含有相同體積比的睪丸酮-D3和康力龍-D3混合液，加甲醇-水混合溶液定容，其中，甲醇與水體積比為1：1。