[發明專利]一種液相色譜串聯質譜法同時檢測保健食品中雄激素化合物的方法

有效

• 申請號: 202110744002.1
• 申請日: 2021-07-01
• 公開（公告）號: CN113311094B
• 公開（公告）日: 2022-05-10
• 發明（設計）人: 劉猛;李秀萍;李曉娜;宿艷;萬慧慧
• 申請（專利權）人: 大連理工大學
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/88
• 代理公司: 大連東方專利代理有限責任公司 21212
• 代理人: 周媛媛;李馨

本發明公開了一種液相色譜串聯質譜法測定保健食品中雄激素化合物的方法，屬于保健食品安全檢測技術領域。包括以下步驟(1)超聲提取；(2)渦旋離心萃取；(3)液相色譜?串聯質譜檢測。本發明以乙腈為提取溶劑，渦旋，離心萃取，將保健食品中的雄激素化合物富集到有機相溶液中，之后上清液經氮吹濃縮后用乙腈復溶，利用液相色譜?串聯質譜多反應監測模式檢測，內標法定量。該方法操作簡便，靈敏度高，能同時檢測保健食品中10種雄激素化合物。

技術領域

本發明屬于保健食品質量安全檢測技術領域，涉及一種液相色譜串聯質譜法同時檢測保健食品中雄激素化合物的方法。

背景技術

雄激素化合物(雄激素)為十九碳類固醇激素，主要產生于雄性動物睪丸中或少許分泌于雄性動物的腎上腺皮質上。在哺乳動物中，雄激素主要作用于雄性器官，以維持性功能和促進動物生長發育、維持性功能和第二性征，具有一定的蛋白質同化作用。雄激素受腦垂體和下丘腦調節，二者相互聯系、相互制約，共同調節并控制動物生殖活動。除此之外，雄激素還能夠明顯地加速全身各種蛋白質的合成，能使肌肉發達，增加體重；同時減少氨基酸分解，使尿素生成減少減輕氮質血癥。雄激素在動物界中廣泛分布，激素以睪酮、雄烯二酮等為主要代表，此外還有部分人工合成的酯化、甲氧基化或氟取代的衍生物較為常見。

保健食品，是指具有特定保健功能或能補充維生素、礦物質的食品，適宜于特定人群食用，不以治療疾病為目的，不對人體產生任何急性、亞急性或慢性危害。不法商販為了達到其宣稱的保健功效，在保健食品中非法添加化學藥物，不可避免地會危害人體健康。近年來出現了許多增強體力、改善生長發育類的保健食品，除了添加以西地那非為代表的磷酸二酯酶5抑制劑以外，添加雄性激素類藥物的情況也時有發生。

雄激素及同化激素類藥物可促進機體內脂肪的堆積，導致機體內脂肪重新分布、血脂升高，造成向心性肥胖，嚴重者可以誘發心血管疾病；攝入的食品中含雄激素及同化激素殘留，長期以往可產生負反饋作用等，造成機體的正常生理水平失衡而呈現不良后果，嚴重者可發生心率衰竭等病癥：除此之外，該類激素過多可造成內分泌系統相關腫瘤、生長發育障礙、出生缺陷、生育缺陷及不孕不育等，給人體健康及人類繁衍帶來不良影響。

保健食品基質相對復雜，且雄激素殘留量極低，因此對雄激素殘留的檢測方法、靈敏度等均有較高要求。

發明內容

針對現有技術的問題，本發明提供了一種快速、簡便、靈敏度高的保健食品中雄激素化合物的測定方法，以實現保健食品中雄激素的同時定性及定量檢測。

為實現以上目的，技術方案如下：

一種液相色譜串聯質譜法同時檢測保健食品中雄激素化合物的方法，包括以下步驟：

(1)提取：向待測樣品中加入同位素內標混合溶液和乙腈后，超聲提取。

(2)渦旋離心萃取：樣品液渦旋混合后離心，取上層乙腈溶液，加熱氮吹濃縮至一定體積，加乙腈定容。

(3)液相色譜串聯質譜檢測：定容后的溶液經0.22μm有機濾膜過濾后，進行液相色譜串聯質譜檢測，繪制標準工作曲線，內標法定量，根據峰面積計算雄激素的濃度。

進一步地，雄激素化合物碳原子數為19個的類固醇激素。

進一步地，所述雄激素化合物為1,4-雄烯二酮、17α-群勃龍、群勃龍、雄烯二酮、諾龍、勃地酮、17α-勃地酮、睪酮、甲睪酮和司坦唑醇。

進一步地，步驟(1)包括：

口服液：量取待測口服液于離心管中，加入1μg/mL的同位素內標混合溶液50μL，加乙腈9mL，超聲混合10-15min；

片劑、膠囊：稱取試樣于離心管中，加入1μg/mL的同位素內標混合溶液50μL，加乙腈10mL，超聲混合10-15min。