[發(fā)明專利]一種檢測(cè)抗蛋白酶體亞基α1-IgG抗體的試劑盒

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110743551.7
• 申請(qǐng)日: 2021-07-01
• 公開（公告）號(hào): CN113447659B
• 公開（公告）日: 2022-05-17
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 葉青;毛建華;田丹丹
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 浙江大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N33/68
• 分類號(hào): G01N33/68;G01N33/58;G01N33/573;G01N33/543
• 代理公司: 杭州求是專利事務(wù)所有限公司 33200
• 代理人: 趙杭麗

1. 一種蛋白酶體亞基α1抗原蛋白在制備用于自身免疫性腎病綜合征檢測(cè)的試劑盒中的應(yīng)用，其特征在于，所述試劑盒由蛋白酶體亞基α1抗原蛋白、固相載體、標(biāo)記抗體、抗原稀釋液、樣品稀釋緩沖液、抗體稀釋液、底物顯色劑、洗滌液、標(biāo)準(zhǔn)品、陽(yáng)性質(zhì)控品、陰性質(zhì)控品組成；所述抗原蛋白蛋白酶體亞基α 1的序列如SEQ ID:1所示；所述標(biāo)記抗體為酶標(biāo)記、化學(xué)發(fā)光劑標(biāo)記或生物素標(biāo)記的二抗；所述的蛋白酶體亞基α1抗原蛋白上帶有標(biāo)簽肽；所述標(biāo)準(zhǔn)品和陽(yáng)性質(zhì)控品為重組人抗標(biāo)簽肽免疫球蛋白G，或從血清中提取抗蛋白酶體亞基α1-IgG抗體作為陽(yáng)性質(zhì)控品和標(biāo)準(zhǔn)品，陰性質(zhì)控品為健康體檢者血清；通過檢測(cè)患者血清樣本中抗蛋白酶體亞基α1-IgG抗體來診斷自身免疫性腎病綜合征。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述的標(biāo)簽肽包括：GST標(biāo)簽、c-Myc標(biāo)簽、His標(biāo)簽、Flag標(biāo)簽或生物素標(biāo)簽。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述蛋白酶體亞基α 1抗原蛋白經(jīng)鎳柱親和層析、分子篩層析、離子交換柱層析或疏水柱純化。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述抗原蛋白蛋白酶體亞基α1固定于固相載體上，所述固相載體選用硝酸纖維素膜、尼龍膜、離子交換樹脂、聚苯乙烯微孔板或磁珠。

5.權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其特征在于，利用物理吸附或化學(xué)結(jié)合將蛋白酶體亞基α 1抗原蛋白通過直接的方式固定于固相載體上。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述底物顯色劑為TMB、AMPPD、4-MUP、BCIP；所述抗原稀釋液為含有163 mM NaCl、1％ TritonX-100的1x PBS pH7.4 ；所述樣品稀釋緩沖液為含有10％ BSA的0.01M PBS pH7.4；所述抗體稀釋液為含有1M D-glucose、2％ 甘油、0.35％ Tween20的0.01M PBS pH7.4；所述洗滌液為：含有163mM NaCl、10％ 甘油、1％ TritonX-100的1x PBS pH7.4。