[發明專利]一種檢測抗原肌球蛋白1-IgG抗體的試劑盒

有效

• 申請號: 202110743541.3
• 申請日: 2021-07-01
• 公開（公告）號: CN113588942B
• 公開（公告）日: 2022-04-19
• 發明（設計）人: 葉青;毛建華;韓秀翠
• 申請（專利權）人: 浙江大學
• 主分類號: G01N33/564
• 分類號: G01N33/564;G01N33/543;G01N33/545;G01N33/548
• 代理公司: 杭州求是專利事務所有限公司 33200
• 代理人: 趙杭麗

本發明提供一種檢測抗原肌球蛋白1?IgG抗體的試劑盒，由抗原蛋白Tropomyosin 1(原肌球蛋白1)、固相載體、標準品、陽性質控品、陰性質控品、標記抗體、底物顯色液、抗體稀釋液、抗原稀釋液、樣品稀釋緩沖液、洗滌液、終止液等組成。本發明利用抗Tropomyosin1?IgG抗體所對應的靶抗原Tropomyosin 1，以人抗標簽肽的IgG作為定量檢測的標準品，對血清中形成的抗原抗體復合物進行抗Tropomyosin 1?IgG抗體檢測。本發明試劑盒操作簡便，試劑穩定性非常好，便于儲存，填補了國內外鑒別免疫性腎病綜合征患者生物標志物的空白。

技術領域

本發明屬于生物技術領域，涉及一種檢測血清中抗原肌球蛋白1-IgG抗體的試劑盒。本發明首次為免疫性腎病綜合征提供了一種快速簡便且高靈敏地定性或定量分析抗原肌球蛋白1-IgG水平的檢測試劑盒。

背景技術

免疫性腎病綜合征的診斷和治療是生物醫學科學中的一項持續的挑戰。腎病綜合征是一類因腎小球濾過膜的通透性增加，導致血漿蛋白的濾出增多，從而引發大量的蛋白尿的一系列特征性的病理變化的臨床綜合癥。在很大程度上所表現出的許多癥狀可以由多樣的原因引發(包括先天遺傳原因、腎功能損害與功能不全、泌尿生殖道的感染與疾病、藥物濫用、食欲不振及營養不良、糖尿病、高血壓、感染、損傷、免疫的缺陷和癌癥)。

腎病綜合征的早期診斷與預測尤為重要。原發性腎病綜合征的年發病率因種族和國籍而異，大約在1.15～16.9/10,0000。微小病變性腎病綜合征是最為常見的病理類型，這類病人絕大多數對激素治療敏感，但是10％～20％左右的患兒會出現激素耐藥，此類患兒在診斷后的5年內進展為終末期腎病的概率為8％～35％，在診斷后的15年內進展為終末期腎病的概率為24％～66％。

Ali等學者觀察發現難治性微小病變的病人的腎臟被移植到受者體內后，腎臟功能轉為正常并未出現蛋白尿，由此發生蛋白尿的可能主要是供者的內環境出現了某些方面的問題。除部分因基因缺陷而發病的患兒，大部分原發性腎病綜合征的患兒在接受了激素和免疫抑制劑的治療后，病情都發生了明顯的好轉，因此原發性腎病綜合征的發生可能與患者的自身免疫狀況密切相關。

抗原結合B細胞表面的BCR，而后通過Igα/Igβ轉導到B細胞內，這是B細胞活化的第一信號。同時Th細胞上表達的CD154分子與B細胞表面的CD40分子的相互作用為B細胞的有效活化提供第二信號。這是B細胞增殖、生發中心反應以及最終分化為漿細胞的至關重要的信號。此類漿細胞能夠合成并分泌針對上述抗原的特異抗體。近年來的研究發現B細胞功能異常在原發性腎病綜合征中發揮了重要的作用。激素敏感型腎病綜合征患者疾病復發時，其外周血中的B細胞的數量會顯著增加，激素依賴型腎病綜合征病人體內檢測到大量的被活化的B細胞，而處于緩解期的激素敏感型腎病綜合征患者體內B細胞的數量則明顯下降。同時發現糖皮質激素不能有效的抑制激素敏感型或激素依賴型腎病綜合征患者體內B細胞的活化。

環磷酰胺和利妥昔單抗能在激素依賴性的疾病患者體內通過清除B細胞而達到停藥后誘導病人的長期緩解。利妥昔單抗可以與前B細胞和成熟B細胞表面的跨膜抗原CD20特異性地結合，通過激活補體，抗體依賴的細胞毒性作用，及誘導細胞凋亡的三種途徑來清除B細胞，從而發揮免疫抑制作用。此外，記憶B細胞(特別是轉換的記憶B細胞數量)可以預測利妥昔單抗治療后的復發情況。雖然全球多個多中心的臨床研究發現利妥昔單抗能成功的用于微小病變腎病綜合征的治療，但有研究發現利妥昔單抗在治療激素依賴性腎病綜合征的過程中，其清除B細胞的作用能維持大約5個月左右，繼后在6到7個月左右隨著B細胞的數量回升，病情也會復發。由此可知原發性腎病綜合征的患者體內有病理性B細胞的克隆，這些病理性B細胞的克隆的鑒別和精準清除顯得尤為重要。