[發明專利]一種蠶蛹肽及其制備和應用

有效

• 申請號: 202110739207.0
• 申請日: 2021-06-28
• 公開（公告）號: CN113278669B
• 公開（公告）日: 2023-06-06
• 發明（設計）人: 劉小玲;沈圓圓;王成華;秦雅莉;于福田;盧美杉
• 申請（專利權）人: 廣西大學
• 主分類號: C12P21/00
• 分類號: C12P21/00;C12N1/20;C07K1/30;A61P29/00;C12R1/07
• 代理公司: 廣西南寧公平知識產權代理有限公司 45104
• 代理人: 黃宗全

1.一種蠶蛹肽的制備方法，其特征在于，以蠶蛹為原料，將蠶蛹經脫脂?后采用堿溶酸沉法獲得蠶蛹蛋白粉，然后使用納豆菌液態發酵獲得；具體操作如下：納豆菌種子液以1%-7％(v/v)的接種量接種至發酵培養基中，初始?pH?值?5-9，并置于?30-45℃溫度下進行振蕩培養，培養?24-40h?后終止發酵，5000-?9000r/min?和?4℃條件下離心?10-30min?以除去菌體沉淀和未利用的蠶蛹蛋白殘渣，取上清液用?0.22-0.45μm?微孔濾膜過濾，并將其冷凍干燥，即得蠶蛹肽；?所述的發酵培養基按以下步驟制備：稱取蠶蛹蛋白粉、葡萄糖、磷酸二氫?鉀、磷酸氫二鉀、硫酸鎂，加入蒸餾水配置成含蠶蛹蛋白粉?1%-5％(m/v)，葡?萄糖1％(m/v)、磷酸二氫鉀0.1％(m/v)、磷酸氫二鉀0.25％(m/v)、硫酸鎂?0.5％(m/v)的懸濁液，放入?121℃?高壓滅菌鍋滅菌?20min。

2.根據權利要求?1所述蠶蛹肽的制備方法，其特征在于，所述的脫脂按以下步驟進行：將蠶蛹勻漿后凍干，然后過?80目篩，取蠶蛹粉置于7-9?倍體積的正己烷中，40-50℃條件下磁力攪拌3-5h，離心棄上清液，通風櫥晾干，?即為脫脂蠶蛹粉。

3.?根據權利要求1所述蠶蛹肽的制備方法，其特征在于，所述的堿溶酸沉法按以下步驟進行：將脫脂蠶蛹粉和蒸餾水配制成?5%-15%?(m/v?)的懸濁液，?用?1mol/L?NaOH?調pH至10.0，40-50℃攪拌?3-5h，5000-9000r/min?離心處理?10-30min，收集上層清液用?1mol/L?HCl?調?pH?至4.0，再5000-9000r/min?離心處理?10-30min?，收集沉淀，然后取沉淀用蒸餾水復水脫鹽，冷凍干燥，即為蠶蛹蛋白粉。

4.?根據權利要求1?所述蠶蛹肽的制備方法，其特征在于，所述的納豆菌液態發酵按以下步驟進行：取納豆菌接入種子培養基，放入?37℃、120-200?r/min?搖床振蕩培養?6-34h，制得?10⁷?-10^8?CFU/mL?的種子液，種子液以1%-7％?(v/v)的接種量接種至發酵培養基中，初始pH值?5-9，并置于30-45℃溫度下進行振蕩培養，培養?24-40h后終止發酵，5000-9000r/min?和?4℃條件下離心?10-30min?以除去菌體沉淀和未利用的蠶蛹蛋白殘渣，取上清液用?0.22-?0.45μm?微孔濾膜過濾，并將其冷凍干燥，即得蠶蛹肽。

5.權利要求1-4任一項權利要求所述蠶蛹肽的制備方法制備出的蠶蛹肽在制備治療炎癥性疾病藥物上的應用。