[發明專利]一種用于檢測百菌清的多色熒光試紙條的制備方法

在審

• 申請號: 202110737467.4
• 申請日: 2021-06-30
• 公開（公告）號: CN113341144A
• 公開（公告）日: 2021-09-03
• 發明（設計）人: 戴志暉;盛恩澤;朱欽舒
• 申請（專利權）人: 南京師范大學
• 主分類號: G01N33/569
• 分類號: G01N33/569;G01N33/558;G01N21/64;G01N33/533
• 代理公司: 南京蘇高專利商標事務所(普通合伙) 32204
• 代理人: 曹坤

本發明公開了一種用于檢測百菌清的多色熒光試紙條的制備方法。屬于食品檢測領域；具體步驟：制備碲化鎘量子點，通過攪拌制備碲化鎘量子點I、II；將其進行標記再進行混合，后滴加到試紙條樣品墊上進行放置；拍攝圖像導入至Image J軟件中，進行通道分離，得到深色光和淺色光的兩種光密度；將深淺兩種光的光密度比值標記為縱坐標，百菌清提取液的濃度對數標記為橫坐標建立標準曲線，從而獲得線性方程，最后將檢測結果帶入線性方程中計算出樣品中百菌清的含量。本發明以食品和環境樣品作為檢測樣品，表現出優異的特異性，在試紙條T線可以進行多色顯示的情況下，對實際檢測結果有著更為直接，更為靈敏的顯示。

技術領域

本發明屬于食品檢測領域，具體地，涉及一種基于量子點的百菌清殘留多色熒光試紙條的及其在食品和環境樣品中的應用方法。

背景技術

百菌清是一種取代苯類廣譜殺菌劑，可以很好的防治果蔬類的病害，隨著歷年用量的提升，百菌清已成為世界第二大產量的殺菌劑。因此環境和農產品中殘留的百菌清含量逐年增加。百菌清及其代謝產物易溶于水，在自然界中不易降解，具有明顯的累積毒性，對魚類和水生無脊椎動物具有高毒性。2017年，研究人員發現百菌清具有顯著的致癌致畸作用，因此在2017年世界衛生組織將其列入到2B類致癌清單里面。而在2020年7月12日，瑞士聯邦水科學技術研究院的研究人員在阿爾卑斯山的水源中發現了百菌清的殘留。因此對百菌清的殘留進行實時檢測很有必要。

研究表明免疫層析試紙條(ICS)具有令人印象深刻的實用性，但由于其結果只是定性檢測，不能提供適當的靈敏度和足夠的檢測限(LOD)和半定量讀出方法，而基于熒光的ICS可以提供足夠的靈敏度和LOD。量子點(QDs)作為熒光ICS的信標分子有著良好的穩定性以及不同的特征信標顏色，因此可以利用多種顏色的熒光QDs進行組裝，以此來達到多顏色示蹤待測物含量的目的。但目前基于多色熒光QDs組裝開發成“交通信號燈”似的熒光ICS在農藥殘留檢測領域鮮有報道。

發明內容

發明目的：本發明的目的是提供了一種基于量子點的百菌清殘留多色熒光試紙條的制備方法；其制備方法簡單易操作，可重復性強。

本發明的另一目的在于說明上述百菌清多色熒光試紙條作為快速檢測方法在食品和環境樣品檢測中的應用。

技術方案：本發明所述的一種用于檢測百菌清的多色熒光試紙條的制備方法，具體操作步驟如下：

(1)、利用碲粉和硼氫化鈉制備碲化鎘量子點，對制備的碲化鎘量子點進行攪拌，通過改變攪拌的時間制備碲化鎘量子點I和碲化鎘量子點II；

(2)、將制備的碲化鎘量子點I和碲化鎘量子點II分別與百菌清模擬表位多肽及百菌清抗體免疫復合體多肽進行標記；

(3)、將現有的百菌清提取液與通過標記過百菌清模擬表位多肽及百菌清抗體免疫復合體多肽的碲化鎘量子點I和碲化鎘量子點II進行混合，后將上述混合液滴加到試紙條樣品墊上進行放置，肉眼在紫外燈下觀察結果或用智能手機拍攝結果；

(4)、在紫外燈照射下用手機拍攝圖像，將拍攝的圖片導入至Image J軟件中，對導入的圖片顏色進行通道分離，分別測量試紙條檢測線區域的平均光密度，從而得到深色光和淺色光的兩種光密度；

將深淺兩種光的光密度比值標記為縱坐標，百菌清提取液的濃度對數標記為橫坐標建立標準曲線，從而獲得線性方程，最后將檢測結果帶入線性方程中計算出樣品中百菌清的含量。

進一步的，在步驟(1)中，所述碲粉與硼氫化鈉的質量比是：3:10。

進一步的，在步驟(1)中，所述碲化鎘量子點I的攪拌時間為30min；所述碲化鎘量子點II的攪拌時間為60min。

進一步的，在步驟(2)中，將制備的碲化鎘量子點I和碲化鎘量子點II分別與百菌清模擬表位多肽及百菌清抗體免疫復合體多肽進行標記；其具體是：