[發(fā)明專利]雷公藤的質(zhì)量檢測方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202110735840.2
• 申請日: 2021-06-30
• 公開（公告）號: CN113376291A
• 公開（公告）日: 2021-09-10
• 發(fā)明（設計）人: 唐于平;白雪;付瑞嘉;徐頂巧;樂世俊
• 申請（專利權）人: 陜西中醫(yī)藥大學
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/34;G01N30/86
• 代理公司: 南京經(jīng)緯專利商標代理有限公司 32200
• 代理人: 陸志斌

本發(fā)明公開了一種雷公藤的質(zhì)量檢測方法，本發(fā)明通過大量實驗篩選，采用超高效液相色譜檢測，該檢測方法可以同時檢測雷公藤中雷公藤甲素、雷公藤內(nèi)酯酮等二萜類成分，雷公藤紅素、雷公藤內(nèi)酯甲等三萜類成分，雷公藤晉堿、雷公藤次堿等生物堿類。方法學檢測結果表明，該方法檢測靈敏度高，穩(wěn)定性好，可以客觀、全面、準確地評價雷公藤制劑的質(zhì)量，對控制質(zhì)量和保證臨床療效具有重要意義。

技術領域

本發(fā)明涉及一種中藥制劑的質(zhì)量控制方法，具體涉及雷公藤的質(zhì)量檢測方法。

背景技術

雷公藤是衛(wèi)矛科雷公藤屬植物雷公藤Tripterygium wilfordii Hook.f.的根，又名黃藤、斷腸草等，主產(chǎn)于福建、浙江、安徽、河南等地，主要以去皮根的木質(zhì)部入藥。其藥用最早記載于明朝蘭茂所著的《滇南本草》，稱其“味辛，性溫，有毒。入肝脾十二經(jīng)，行十二經(jīng)絡”，具有“治筋骨疼痛、風寒濕痹、麻木不仁、癱瘓痿軟、濕氣流痰”等功效。目前認為雷公藤的有效成分主要包括二萜類、生物堿類、三萜類及苷類等，其中很多成分既是抗炎及免疫抑制的有效成分，又是毒性成分。現(xiàn)代藥理研究證實雷公藤具有抗炎、免疫調(diào)節(jié)、抗動脈粥樣硬化、抗腫瘤、抗排異、抗血管生成、骨保護、神經(jīng)保護等作用。雷公藤已作為一種非甾體抗炎劑和免疫抑制劑已廣泛用于臨床治療RA，是公認療效確切的單味中藥。雷公藤多苷片為從雷公藤中提取分離到的一種有效組分，含多種二萜內(nèi)酯、生物堿、三萜類及苷類成分，具有獨特的抗炎和免疫抑制效應，現(xiàn)已被制成中藥制劑，通過國家食品藥品監(jiān)督管理局批準用于治療包括RA在內(nèi)的自身免疫性和炎性疾病.

目前，關于雷公藤及其藥物制劑的多成分檢測質(zhì)量控制方法局限于有限的少數(shù)個別化合物，不能全面反應雷公藤的質(zhì)量。

因此，為了充分控制好雷公藤及其提取物和制劑的質(zhì)量，維護患者的利益，很有必要在現(xiàn)有技術的基礎之上研究設計出能準確全面檢測雷公藤及其制劑有效成分的檢測方法。

發(fā)明內(nèi)容

發(fā)明目的：本發(fā)明的目的是解決現(xiàn)有技術的不足，經(jīng)過大量實驗篩選，提供一種雷公藤的有效成分的含量測定方法。該方法可同時檢測雷公藤及其制劑中的二萜類成分、三萜類成分和生物堿類成分。本發(fā)明經(jīng)方法學證明，本發(fā)明提供的檢測方法，靈敏度高，穩(wěn)定性好，可以客觀、全面、準確地評價雷公藤藥材及其提取物與制劑的質(zhì)量，對控制質(zhì)量和保證療效具有重要意義。

技術方案：為了實現(xiàn)以上目的，本發(fā)明采取的技術方案為：

一種雷公藤的質(zhì)量檢測方法，包括以下步驟：

步驟(1)混合對照品溶液的制備

精密稱取雷公藤次堿、雷公藤春堿、雷公藤吉堿、雷公藤甲素、雷公藤內(nèi)酯酮、雷酚內(nèi)酯、雷公藤紅素、雷公藤內(nèi)酯甲對照品適量，分別加甲醇制備成單一對照品儲備液；精密吸取上述對照品儲備液適量，混合后加甲醇稀釋，最終制成雷公藤次堿、雷公藤春堿、雷公藤吉堿、雷公藤甲素、雷公藤內(nèi)酯酮、雷酚內(nèi)酯、雷公藤紅素、雷公藤內(nèi)酯甲的混合對照品溶液；

步驟(2)供試品溶液的制備

取雷公藤或雷公藤制劑，精密加入醇類溶劑，提取，合并提取液，濾過，續(xù)濾液過微孔濾膜，制得供試品溶液；

步驟(3)線性回歸方程的建立

取步驟(1)的混合對照品依次稀釋5倍，得到系列濃度的對照品溶液，依次注入UPLC，以系列對照品濃度作為橫坐標X，對應的峰面積為縱坐標Y，對各化學成分進行線性回歸分析并計算線性回歸方程；

步驟(4)含量測定

取步驟(2)的雷公藤供試品溶液注入UPLC進行分析，將峰面積代入步驟(3)的線性回歸方程，計算供試品溶液中雷公藤次堿、雷公藤春堿、雷公藤吉堿、雷公藤甲素、雷公藤內(nèi)酯酮、雷酚內(nèi)酯、雷公藤紅素、雷公藤內(nèi)酯甲的含量。

作為優(yōu)選方案，以上所述的雷公藤的質(zhì)量檢測方法，步驟(1)混合對照品溶液的制備