[發明專利]雷公藤的質量檢測方法

在審

• 申請號: 202110735840.2
• 申請日: 2021-06-30
• 公開（公告）號: CN113376291A
• 公開（公告）日: 2021-09-10
• 發明（設計）人: 唐于平;白雪;付瑞嘉;徐頂巧;樂世俊
• 申請（專利權）人: 陜西中醫藥大學
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/34;G01N30/86
• 代理公司: 南京經緯專利商標代理有限公司 32200
• 代理人: 陸志斌

1.一種雷公藤的質量檢測方法，其特征在于，包括以下步驟：

步驟(1)混合對照品溶液的制備

精密稱取雷公藤次堿、雷公藤春堿、雷公藤吉堿、雷公藤甲素、雷公藤內酯酮、雷酚內酯、雷公藤紅素、雷公藤內酯甲對照品適量，分別加甲醇制備成單一對照品儲備液；精密吸取上述對照品儲備液適量，混合后加甲醇稀釋，最終制成雷公藤次堿、雷公藤春堿、雷公藤吉堿、雷公藤甲素、雷公藤內酯酮、雷酚內酯、雷公藤紅素、雷公藤內酯甲的混合對照品溶液；

步驟(2)供試品溶液的制備

取雷公藤或雷公藤制劑，精密加入醇類溶劑，提取，合并提取液，濾過，續濾液過微孔濾膜，制得供試品溶液；

步驟(3)線性回歸方程的建立

取步驟(1)的混合對照品依次稀釋5倍，得到系列濃度的對照品溶液，依次注入UPLC，以系列對照品濃度作為橫坐標X，對應的峰面積為縱坐標Y，對各化學成分進行線性回歸分析并計算線性回歸方程；

步驟(4)含量測定

取步驟(2)的雷公藤供試品溶液注入UPLC進行分析，將峰面積代入步驟(3)的線性回歸方程，計算供試品溶液中雷公藤次堿、雷公藤春堿、雷公藤吉堿、雷公藤甲素、雷公藤內酯酮、雷酚內酯、雷公藤紅素、雷公藤內酯甲的含量。

2.根據權利要求1所述的雷公藤的質量檢測方法，其特征在于，

步驟(1)混合對照品溶液的制備

精密稱取雷公藤次堿、雷公藤春堿、雷公藤吉堿、雷公藤甲素、雷公藤內酯酮、雷酚內酯、雷公藤紅素、雷公藤內酯甲對照品適量，分別加甲醇制備成單一對照品儲備液；精密吸取上述對照品儲備液適量，混合后加甲醇稀釋，最終制成每1mL含雷公藤次堿0.013mg、雷公藤春堿0.2500mg、雷公藤吉堿0.1500mg、雷公藤甲素0.0006mg、雷公藤內酯酮0.0005mg、雷酚內酯0.00125mg、雷公藤紅素0.0045mg、雷公藤內酯甲0.004mg的混合對照品溶液。

3.根據權利要求1所述的雷公藤的質量檢測方法，其特征在于，步驟(2)供試品溶液的制備方法為：

取雷公藤或雷公藤制劑，精密加入6～12倍量的甲醇或乙醇，回流或超聲提取2～3次，每次0.5～2小時，合并提取液，濾過，續濾液過微孔濾膜，制得供試品溶液。

4.根據權利要求1所述的雷公藤的質量檢測方法，其特征在于，步驟(3)和步驟(4)中的UPLC的色譜條件為：

采用UPLCBEHC₁₈色譜柱，規格為100mm×2.1mm，1.7μm，流動相A相為乙腈-B相為水，梯度洗脫：；流速：0.4mL·min^-1，進樣量1μL，柱溫35℃，自動進樣器溫度10℃；

質譜條件為：

采用XevoTQ-XS質譜系統進行質譜檢測，該系統配有ESI源，以正負模式進行檢測，電離源條件設定為：毛細管電壓3.0kV；脫溶溫度400℃；錐氣流量150L/h；脫溶氣體流量為1000L/h。碰撞氣體采用氬氣；采用MRM模式進行檢測和定量。

5.根據權利要求4所述的雷公藤的質量檢測方法，其特征在于，梯度洗脫方式為：0～2.08min，A：30％～40％；2.08～4.17min，A：40％～49％；4.17～6.25min，A：49％～49％；6.25～7.29min，A：49％～55％；7.29～8.34min，A：55％～80％；8.34～9.38min，A：80％～85％；9.38～10.42min，A：85％～30％。

6.根據權利要求4所述的雷公藤的質量檢測方法，其特征在于，8種化學成分的質譜檢測參數如下：

7.根據權利要求1所述的雷公藤的質量檢測方法，其特征在于，步驟(3)中建立的標準曲線為：