[發明專利]豬偽狂犬病毒LAMP檢測引物組及試劑盒有效
| 申請號: | 202110726270.0 | 申請日: | 2021-06-29 |
| 公開(公告)號: | CN113234864B | 公開(公告)日: | 2023-08-01 |
| 發明(設計)人: | 俞國華;楊小燕;戴愛玲;范克偉;劉建奎;黃翠琴;楊守深;尹會方;李曉華;王鑫;包銀莉 | 申請(專利權)人: | 龍巖學院 |
| 主分類號: | C12Q1/70 | 分類號: | C12Q1/70;C12Q1/6844;C12N15/11 |
| 代理公司: | 福州君誠知識產權代理有限公司 35211 | 代理人: | 戴雨君 |
| 地址: | 364012*** | 國省代碼: | 福建;35 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 狂犬病毒 lamp 檢測 引物 試劑盒 | ||
1.一種豬偽狂犬病毒LAMP檢測試劑盒,其特征在于,所述的試劑盒包含豬偽狂犬病毒LAMP檢測引物組、Bst?DNA聚合酶、dNTP、MgSO4、Betaine、10X?LAMP反應緩沖液、以及對反應結果起指示作用的HNB;
所述豬偽狂犬病毒LAMP檢測引物組包括6條引物,6條引物的核苷酸序列分別如SEQ?IDNO.?1-?SEQ?ID?NO.6所示,具體如下:
SEQ?ID?NO.?1(PRV-F3):?5′?-gtacgtgctcgtgatgacc-3′
SEQ?ID?NO.?2(PRV?-B3):?5′?-gcgccagcacaaacagc-3′
SEQ?ID?NO.?3(PRV?-FIP):?5′?-cgtcagctccttgatgaccgtgttacctgggactacacgctc-3′
SEQ?ID?NO.?4(PRV?-BIP):?5′?-acgcgatctacgtggacggctttccggccgtacgggtt-3′
SEQ?ID?NO.?5(PRV?-LF):?5′?-acgtactcggccgcggtg-3′
SEQ?ID?NO.?6(PRV?-LB):?5′?-gcccgcgcgcccgtg-3′;
所述試劑盒的各組分及其含量如下:引物組?2?μL、8?Units?/μL?Bst?DNA聚合酶?2.4μL、25?mM?dNTP?3?μL、150?mM?MgSO4?2?μL、5?M?Betaine?10?μL、10X?LAMP反應緩沖液?6?μL、3?mM?HNB?2.4?μL、用去離子水補足到40?μL,檢測時,加入DNA樣品20?μL,反應總體積為60?μL;
所述引物組中,各引物的摩爾濃度如下:PRV-F3和PRV-B3的摩爾濃度均為20?μM,PRV-FIP和PRV-BIP的摩爾濃度均為160?μM,PRV-LF和PRV-LB的摩爾濃度均為80?μM。
2.根據權利要求1所述的豬偽狂犬病毒LAMP檢測試劑盒,其特征在于,所述試劑盒還包含陽性對照質粒。
3.根據權利要求1所述的豬偽狂犬病毒LAMP檢測試劑盒,其特征在于,所述試劑盒的反應條件為:61?℃,?90?min。
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