[發明專利]一種有機酸的分離檢測方法

在審

• 申請號: 202110711584.3
• 申請日: 2021-06-25
• 公開（公告）號: CN115524407A
• 公開（公告）日: 2022-12-27
• 發明（設計）人: 蔣瀟瀟;胡軼敏;李雷;高紅旗;殷晶莉;蔡超
• 申請（專利權）人: 武漢武藥科技有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/34;G01N30/36;G01N30/89
• 代理公司: 北京領科知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 11690
• 代理人: 張丹

本發明提供了一種有機酸的分離和/或檢測方法，所述方法包括采用高效液相色譜法對含有有機酸的樣品分離和/或檢測，所述高效液相色譜法使用的流動相包括：三氟乙酸水溶液和高氯酸鈉。相比于現有技術，其可將門冬氨酸、L?酒石酸和內消旋酒石酸兩兩分離，操作過程簡單，準確性高，可實現三種物質的定性和定量分析；本發明的方法還特別適合于門冬氨酸帕瑞肽注射液的質量檢測，利用高效液相色譜方法既可以確定酒石酸的類型，又可以對門冬氨酸、L?酒石酸和內消旋酒石酸任意一種物質進行含量測定。

技術領域

本發明涉及藥物分析檢測領域，具體涉及一種有機酸的分離和/或檢測方法，特別的涉及適用于門冬氨酸帕瑞肽注射液的分析檢測方法。

背景技術

酒石酸(tartaric acid)，即，2,3-二羥基丁二酸，其具有多種用途，如其是葡萄酒中主要的有機酸之一；其還可以作為食品中添加的抗氧化劑﹐可以使食物具有酸味；其還可作為飲料添加劑；其還可作為藥用輔料。然而，酒石酸分子中含有兩個相同的手性碳原子，存在三種立體異構體：D-酒石酸、L-酒石酸和內消旋酒石酸。在一些應用場景尤其是作為藥用輔料時，需要對其具體構型進行確認、控制含量，以嚴格控制藥物質量，而現有技術中，尚未見到對于門冬氨酸、L-酒石酸和內消旋酒石酸分離的有效方案。

CN109738560A公開了一種測定酒石酸光學異構體含量的方法，該方法將待測酒石酸進行高效液相色譜檢測，所述高效液相色譜檢測是通過結合紫外檢測器的高效液相色譜儀進行的，基于高效液相色譜檢測結果，確定所述待測酒石酸中L(+)-酒石酸和D(-)-酒石酸的含量，然而，所述待測酒石酸預先需經過衍生化處理，操作復雜，準確度差，且無法對內消旋酒石酸進行分離檢測。

從前述現有技術可見，對于門冬氨酸、L-酒石酸和內消旋酒石酸直接進行分析和檢測的方法并不存在。

因此，有針對性的提供一種對門冬氨酸、L-酒石酸和內消旋酒石酸中任意兩種分離檢測方法，是亟待解決的技術問題。

發明內容

針對現有技術中缺少針對門冬氨酸、L-酒石酸和內消旋酒石酸三種有機酸中的任意兩種的分離和檢測方法，尤其是L-酒石酸和內消旋酒石酸的分離檢測方法，更缺少適合門冬氨酸帕瑞肽注射液的分析檢測方法，由此，在本發明的第一方面，本發明提供一種有機酸的分離和/或檢測方法，所述方法包括采用高效液相色譜法對含有有機酸的樣品分離和/或檢測，所述高效液相色譜法使用的流動相包括：三氟乙酸水溶液和高氯酸鈉，所述含有有機酸的樣品包括門冬氨酸、L-酒石酸和內消旋酒石酸中的至少一種。

進一步地，所述的含有有機酸的樣品包括門冬氨酸、L-酒石酸和內消旋酒石酸中的至少兩種；優選地，所述的含有有機酸的樣品包括門冬氨酸、L-酒石酸和內消旋酒石酸。

進一步地，所述高效液相色譜法所得色譜圖中，L-酒石酸和內消旋酒石酸對應的色譜峰之間的分離度大于1.5。

優選地，所述高效液相色譜法所得色譜圖中，門冬氨酸、L-酒石酸和內消旋酒石酸對應的色譜峰相鄰峰之間的分離度均大于1.5。

進一步地，所述流動相中三氟乙酸水溶液的濃度為0.05-0.15％(v/v)，優選為0.1％(v/v)，所述高氯酸鈉的濃度為45-150mM，優選為50-140mM。

更進一步地，所述高效液相色譜法采用的色譜柱為C18色譜柱；優選地，所述色譜柱為GL Inertsil ODS-3柱。

更進一步地，所述高效液相色譜法采用的柱溫為25-35℃。

更進一步地，所述高效液相色譜法的檢測波長為200-210nm，優選為203-207nm。

更進一步地，所述高效液相色譜法流動相的流速為0.8-1.2ml/min。

任選地，所述高效液相色譜法采用的洗脫方式為等度洗脫。