[發明專利]一種利用西南遠志一步成苗的組培育苗方法

有效

• 申請號: 202110703835.3
• 申請日: 2021-06-24
• 公開（公告）號: CN113207698B
• 公開（公告）日: 2021-11-23
• 發明（設計）人: 張金渝;趙露琴;曾祥飛;楊維澤;鄧國賓;起明菊
• 申請（專利權）人: 云南省農業科學院藥用植物研究所
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 昆明祥和知識產權代理有限公司 53114
• 代理人: 劉敏

本發明涉及藥用植物組織培養領域，具體公開一種西南遠志一步成苗的組培育苗方法，其步驟包括外植體的選擇與清潔、外植體消毒、誘導成苗、馴化，其中外植體誘導培養：將消毒好的外植體用改良MS為基本培養基，添加NAA、TDZ，成苗培養：將誘導出的叢生芽用改良MS培養基，添加NAA，油菜素內脂，TDZ，所述改良MS培養基為將MS培養基中的大量元素中硝酸鉀改為1200mg/L、硝酸銨改為1200mg/L、磷酸二氫鉀改為210mg/L、硫酸鎂改為130mg/L、氯化鈣改為150mg/L，同時蔗糖濃度下調至20g/L，其他元素不變，本發明在外植體誘導時產生愈傷，同時又將愈傷再分化成從生芽，減少了培養過程中需經過愈傷組織誘導培養和叢生芽的分化培養，最終減少了生產環節，降低了生產成本。

技術領域

本發明涉及藥用植物組織培養領域，具體涉及一種西南遠志一步成苗的組培育苗方法。

背景技術

西南遠志（Polygala crotalarioides Buch.-Ham.）又名西藏遠志，娘母良，豬大腸等，為遠志科遠志屬多年生草本植物，生于海拔1100～2300m的山坡草地或灌叢中，國內主要分布于云南北部及西部、四川西南部、西藏南部等地。西南遠志以根入藥，主要有祛痰止咳，寧心安神的功效，主要用于治療咳嗽咳痰不爽，心悸，失眠多夢等癥。同時該藥材為云南佤族民間流傳的一種珍奇民族藥，有促進性功能亢進、強筋健骨和增進食欲的功效，長期服用能使眉須秀長，有顏容光澤和痣斑消退之效。現代醫藥藥理研究表明，其具有抗疲勞，抗低溫，抗缺氧，提高機體應激和對不良環境適應能力等功效。

由于在壯陽方面功效較為明顯以及野生資源的消耗，在云南臨滄、普洱、西雙版納等地區開始成一定規模的種植，但其大部分種源均來資源野生采挖后人工大田馴化種植，并有少量開始采用種子以及扦插等方式進行繁殖。由于種子數量較少、發芽率低，扦插繁殖成苗率極低等因素，使得種植規模一直較小。近年來部分單位進行了組培苗繁殖技術研究，通過文獻查閱，發現其增殖系數低，生產技術繁瑣，同時通過對云南地區市場調查發現，僅有少量西南遠志組培苗上市，且價格一般在3～5元/株，極大的限制了西南遠志種植及深加工產業的發展。

發明內容

本發明根據西南遠志發展趨勢以及針對現今種苗繁殖技術的不足，提供了一種生產工藝簡單、生產成本低廉、能短期內提供充足優質的西南遠志種苗繁育技術。

本發明具體是通過以下技術方案實現的：

一種利用西南遠志一步成苗的組培育苗方法，其步驟包括外植體的選擇與清潔、外植體消毒、誘導成苗、馴化，所述誘導成苗包括以下步驟：

（1）外植體誘導培養：將消毒好的外植體用改良MS為基本培養基，添加NAA、TDZ，在溫度25±2 ℃，全黑暗條件下誘導15天；后在溫度25±2 ℃，光照2000-3000LX、光照12小時條件下光暗交替培養20天；

（2）成苗培養：將誘導出的叢生芽用改良MS培養基，添加NAA，油菜素內脂，TDZ，在溫度25±2℃，全黑暗條件下培養7天；后在溫度25±2 ℃，光照2000-3000LX、光照12小時條件下光暗交替培養30天；

所述改良MS培養基為將MS培養基中的大量元素中硝酸鉀改為1200mg/L、硝酸銨改為1200mg/L、磷酸二氫鉀改為210mg/L、硫酸鎂改為130mg/L、氯化鈣改為150mg/L，同時蔗糖濃度下調至20g/L，其他元素不變。優選的，外植體為健壯、無病蟲害西南遠志的幼嫩葉片。

優選的，外植體消毒為依次使用75%酒精25～35s、飽和漂白粉溶液20～30min、0.05%升汞溶液10～12min浸泡外植體后，使用無菌水清洗備用。

優選的，誘導培養基的NAA濃度為0.05～0.15mg/L，TDZ濃度為0.8～1.1mg/L。

優選的，NAA濃度為0.3～0.5mg/L，油菜素內脂濃度為1.5～2.5mg/L，TDZ濃度為0.1～0.3mg/L。