[發(fā)明專利]一種利用西南遠(yuǎn)志一步成苗的組培育苗方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 202110703835.3 | 申請日： | 2021-06-24 |
| 公開（公告）號： | CN113207698B | 公開（公告）日： | 2021-11-23 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 張金渝;趙露琴;曾祥飛;楊維澤;鄧國賓;起明菊 | 申請（專利權(quán)）人： | 云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院藥用植物研究所 |
| 主分類號： | A01H4/00 | 分類號： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 昆明祥和知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 53114 | 代理人： | 劉敏 |
| 地址： | 650000 云南省昆明市盤龍區(qū)*** | 國省代碼： | 云南;53 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 利用 西南 遠(yuǎn)志 一步 培育 方法 | ||
1.一種利用西南遠(yuǎn)志一步成苗的組培育苗方法，其步驟包括外植體的選擇與清潔、外植體消毒、誘導(dǎo)成苗、馴化，其特征在于，所述外植體為健壯、無病蟲害西南遠(yuǎn)志的幼嫩葉片，外植體消毒為依次使用75%酒精25～35s、飽和漂白粉溶液20～30min、0.05%升汞溶液10～12min浸泡外植體后，使用無菌水清洗備用；所述誘導(dǎo)成苗包括以下步驟：
（1）外植體誘導(dǎo)培養(yǎng)：將消毒好的外植體用改良MS為基本培養(yǎng)基，添加NAA、TDZ，在溫度25±2 ℃，全黑暗條件下誘導(dǎo)15天；后在溫度25±2 ℃，光照2000-3000LX、光照12小時(shí)條件下光暗交替培養(yǎng)20天；
（2）成苗培養(yǎng)：將誘導(dǎo)出的叢生芽用改良MS培養(yǎng)基，添加NAA，油菜素內(nèi)脂，TDZ，在溫度25±2 ℃，全黑暗條件下培養(yǎng)7天；后在溫度25±2 ℃，光照2000-3000LX、光照12小時(shí)條件下光暗交替培養(yǎng)30天；
所述改良MS培養(yǎng)基為將MS培養(yǎng)基中的大量元素中硝酸鉀改為1200mg/L、硝酸銨改為1200mg/L、磷酸二氫鉀改為210mg/L、硫酸鎂改為130mg/L、氯化鈣改為150mg/L，同時(shí)蔗糖濃度下調(diào)至20g/L，其他元素不變；
所述步驟（1）中，誘導(dǎo)培養(yǎng)基的NAA濃度為0.05～0.15mg/L，TDZ濃度為0.8～1.1mg/L；
所述步驟（2）中NAA濃度為0.3～0.5mg/L，油菜素內(nèi)脂濃度為1.5～2.5mg/L，TDZ濃度為0.1～0.3mg/L。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用西南遠(yuǎn)志一步成苗的組培育苗方法，其特征在于，所述步驟（2）中還包括擴(kuò)繁培養(yǎng)，將誘導(dǎo)的叢生芽葉片及愈傷組織使用改良MS+NAA 0.3 mg/L+油菜素內(nèi)脂 1.5mg/L+TDZ 0.1mg/L進(jìn)行擴(kuò)繁培養(yǎng)。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用西南遠(yuǎn)志一步成苗的組培育苗方法，其特征在于，所述馴化方法為將生根苗帶瓶置于75%遮陽率的陽光下曬苗7天，移栽于5：1的泥炭土+珍珠巖中，覆小拱棚，30天后移除小拱棚。
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