[發明專利]一種人類骨髓、臍帶血干細胞處理試劑盒及干細胞分離方法

在審

• 申請號: 202110701872.0
• 申請日: 2021-06-24
• 公開（公告）號: CN113308436A
• 公開（公告）日: 2021-08-27
• 發明（設計）人: 唐明淇
• 申請（專利權）人: 海南賽奧干細胞生物科技有限公司
• 主分類號: C12N5/0775
• 分類號: C12N5/0775
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種人類骨髓、臍帶血干細胞處理試劑盒，所述的干細胞處理試劑盒由1號液、2號液組成，所述百分比(％)均為重量百分比(W/W)，密度單位：g/ml，1號液、2號液的溶劑均為水；

1號液：0.1％-30％羥乙基淀粉或0.1％-30％甲基纖維素；

2號液：由聚蔗糖和泛影葡胺配制成的密度為1.0-1.2g/ml的分層液組成。

2.根據權利要求1所述的干細胞處理試劑盒，其特征在于：

其中，所述的1號液和2號液是經過溫度為100℃-130℃，時間為10分鐘-50分鐘滅菌的液體。

3.根據權利要求2所述的干細胞處理試劑盒，其特征在于：

其中，所述的1號液和2號液是經過溫度為105℃-120℃，時間為15分鐘-20分鐘滅菌的液體。

4.一種人類骨髓、臍帶血干細胞處理的方法，所述方法包括：

第一步，將骨髓、臍帶血樣品中加入抗凝劑與適量的磷酸鹽緩沖液，得到混合液一，且抗凝劑為枸櫞酸鈉，并將其放置保存在0-4攝氏度的環境下，

第二步，取混合液一，將其加入到含有一份1號液的大容量培養液瓶中，得到混合液二

第三步，使用磁力攪拌器對混合液二進行混勻，攪拌轉速為300-500r/min，待攪拌均勻后，靜置20-30分鐘，

第四步，靜置后的混合液二出現分層，使用助理移液器對其上層細胞液進行吸取，助理移液器在使用的時候，其槍頭應保證在上層液上液面以下0.5厘米，以及上層液下液面以上0.5厘米之間，將吸取的細胞液進行離心處理并稀釋得到干細胞液，鋪于2號液上方，再次離心處理得到干細胞層。

5.根據權利要求4所述的人類骨髓、臍帶血干細胞分離的方法，其特征在于：離心分離的離心機轉速為500-4000轉/分鐘。

6.根據權利要求5所述的人類骨髓、臍帶血干細胞分離的方法，其特征在于：離心溫度為18-22度，且離心時間為10-20分鐘。