[發(fā)明專利]尿液中18-羥皮質(zhì)醇的檢測方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 202110698650.8 | 申請日： | 2021-06-23 |
| 公開（公告）號： | CN113433234B | 公開（公告）日： | 2023-04-07 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 趙蓓蓓;佘旭輝;饒夢華;梁嘉威;董衡;李卓陽 | 申請（專利權(quán)）人： | 廣州金域醫(yī)學(xué)檢驗中心有限公司 |
| 主分類號： | G01N30/02 | 分類號： | G01N30/02;G01N30/06;G01N30/34;G01N30/72 |
| 代理公司： | 廣州廣典知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 44365 | 代理人： | 萬志香;曾銀鳳 |
| 地址： | 510000 廣東省*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 尿液 18 皮質(zhì)醇 檢測 方法 | ||
1.尿液中18-羥皮質(zhì)醇的檢測方法，其特征在于，包括以下步驟：
樣品前處理：取尿液樣本，與18-羥皮質(zhì)醇穩(wěn)定同位素內(nèi)標(biāo)的工作液混合，再在所得混合液中加入水稀釋，混合后離心，取上清液作為待測樣品溶液，注入高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀測定18-羥皮質(zhì)醇的含量；
所述18-羥皮質(zhì)醇穩(wěn)定同位素內(nèi)標(biāo)的工作液的溶劑為甲醇、乙腈或乙醇；
所述尿液樣本與所述18-羥皮質(zhì)醇穩(wěn)定同位素內(nèi)標(biāo)的工作液的體積比為1:?(1.5~2.5)，所述混合液與水的體積比為1:(1-5)?；
所述高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀的色譜條件包括：
色譜柱：?C18色譜柱；
柱溫：（35±5）℃；
進(jìn)樣器溫度：（15±5）℃；
進(jìn)樣量：（2-6）μL；
流速：0.3-0.5?mL/min；
流動相A為0.1?wt%~0.3wt%甲酸的水溶液，流動相B為0.1?wt%~0.3wt%甲酸的甲醇溶液，采用梯度洗脫；
液相洗脫梯度為：
0~1min，流動相A的體積百分比為60~80%，流動相B的體積百分比為20~40%；
1~3.5?min，流動相A的體積百分比由60~80%降低到30~40%，流動相B的體積百分比由20~40%升高到60~70%；
3.5~3.51?min，流動相A的體積百分比由30~40%降低到0~20%，流動相B的體積百分比由60~70%升高到80~100%；
3.51~4.50min，流動相A的體積百分比為0~20%，流動相B的體積百分比為80~100%；
4.50~4.60min，流動相A的體積百分比由0~20%升高到60~80%，流動相B的體積百分比由80~100%降低到20~40%；
4.60~5.50min，流動相A的體積百分比為60~80%，流動相B的體積百分比為20~40%。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測方法，其特征在于，所述18-羥皮質(zhì)醇穩(wěn)定同位素內(nèi)標(biāo)的工作液的溶劑為甲醇。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測方法，其特征在于，所述尿液樣本與所述18-羥皮質(zhì)醇穩(wěn)定同位素內(nèi)標(biāo)的工作液的體積比為1:2。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測方法，其特征在于，所述混合液與水的體積比為1:(1-3)。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測方法，其特征在于，所述混合液與水的體積比為3:7。
6.根據(jù)權(quán)利要求1~5任一項所述的檢測方法，其特征在于，所述高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀的色譜條件包括：
柱溫：35?℃；
進(jìn)樣器溫度：15?℃；
進(jìn)樣量：4μL；
流速：0.4?mL/min。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測方法，其特征在于，所述高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀的液相洗脫梯度為：
0~1min，流動相A的體積百分比為（70±5）%，流動相B的體積百分比為（30±5）%；
1~3.5?min，流動相A的體積百分比由（70±5）%降低到（35±5）%，流動相B的體積百分比由（30±5）%升高到（65±5）%；
3.5~3.51?min，流動相A的體積百分比由（35±5）%降低到（10±5）%，流動相B的體積百分比由（65±5）%升高到（90±5）%；
3.51~4.50min，流動相A的體積百分比為（10±5）%，流動相B的體積百分比為（90±5）%；
4.50~4.60min，流動相A的體積百分比由（10±5）%升高到（70±5）%，流動相B的體積百分比由（90±5）%降低到（30±5）%；
4.60~5.50min，流動相A的體積百分比為（70±5）%，流動相B的體積百分比為（30±5）%。
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