[發明專利]一種無菌冬蟲夏草寄主幼蟲的產業化飼養方法

有效

• 申請號: 202110696567.7
• 申請日: 2021-06-23
• 公開（公告）號: CN113455468B
• 公開（公告）日: 2023-02-10
• 發明（設計）人: 柴文敏;毛先兵;卜俊熙;卜京
• 申請（專利權）人: 重慶欣時達生物技術有限公司
• 主分類號: A01K67/033
• 分類號: A01K67/033;A23K50/90;A23K10/30;A01G18/00;A01G18/20
• 代理公司: 重慶德創至道知識產權代理事務所(普通合伙) 50245
• 代理人: 陳先權

本發明公開了一種無菌冬蟲夏草寄主幼蟲的產業化飼養方法，將預先制備的無菌卵、無菌飼料、無菌飼養裝置準備好后，放置在無菌室內，并檢測無污染后，打開風機，打開無菌飼養裝置，用無菌工具轉移調配好無菌飼料到無菌裝置中，在放置無菌卵在無菌飼料上，扣緊無菌裝置的頂蓋，放置在無菌生產廠區內。本發明的有益效果包括：飼養無菌蟲，外界無任何病原微生物進入，可提高成活率，其次，無菌蟲因缺乏水平傳播微生物，免疫能力相對較弱，可利于冬蟲夏草菌的侵染。可為研究微生物與冬蟲夏草寄主幼蟲之間健康關系提供專業的平臺，包括某些疾病的病原研究，微生物間的拮抗作用，病毒病的研究，細菌學研究，真菌感染研究，原蟲感染研究。

技術領域

本發明涉及冬蟲夏草人工培植領域，具體涉及一種無菌冬蟲夏草寄主幼蟲的產業化飼養方法。

背景技術

冬蟲夏草，中藥名，為麥角菌科植物冬蟲夏草菌寄生在蝙蝠蛾科昆蟲幼蟲上的子座及幼蟲的尸體的復合體。冬蟲夏草具有調節免疫系統功能、抗腫瘤、抗疲勞、補肺益腎、止血化痰、秘精益氣等多種功效。冬蟲夏草人工培育產業化中，病原微生物較多，導致冬蟲夏草寄主幼蟲死亡率較高，其他微生物的競爭也導致冬蟲夏草寄主幼蟲侵染率有所限制，無法實現人工培育冬蟲夏草的高產，因此，無菌冬蟲夏草寄主幼蟲的產業化飼養尤為重要。

發明內容

針對上述現有技術中的不足之處，本發明提供一種無菌冬蟲夏草寄主幼蟲的產業化飼養方法，其通過培養無菌蟲避免了雜菌感染，提高了冬蟲夏草的純度。

為了達到上述目的，本發明采用了以下技術方案：

一種無菌冬蟲夏草寄主幼蟲的產業化飼養方法，其特征在于：包括以下步驟，

S1、蟲卵的無菌處理，將蝙蝠蛾科昆蟲交尾卵放置在無菌卵消毒裝置內，用濃度為100-300ppm的含氯消毒液浸沒消毒5-20分鐘，取出，無菌水沖洗盡蟲卵表面的消毒劑，得無菌蟲卵；

S2、侵染裝置的制備，取透明玻璃容器作為侵染盒，侵染盒上設置可密封連接的上蓋，上蓋上開設透氣孔，在透氣孔位置設置有無菌濾膜，將侵染盒及上蓋進行滅菌處理；

S3、添加無菌飼料，定量稱取植物塊莖粉、珠芽蓼粉、瓊脂、水混合，加熱溶解，傾倒入步驟S2制備的侵染盒中，高壓蒸汽滅菌，待冷卻凝固得到含固體培養基的侵染盒；

S4、制備無菌幼蟲飼養瓶，按照步驟S3的方式制備含固體培養基的無菌幼蟲飼養瓶；

S5、將步驟S1中得到的無菌卵在無菌室內放置在步驟S3中的侵染盒中，每個侵染盒放入500粒無菌蟲卵，待卵孵化幼蟲1-3個月內可連接菌種發酵裝置將冬蟲夏草菌的發酵液通過總管道直接輸入到侵染盒中，采用霧狀噴灑的方式均勻散布侵染盒中，使得菌種發酵液接觸到無菌幼蟲體表和幼蟲取食的無菌飼料，充分侵染；

S6、把步驟S5中侵染1-3個月后的幼蟲按單只分別轉移至步驟S4中制得的無菌飼養瓶中，所述無菌飼養瓶中盛裝有15-30毫升無菌飼料，每2-4個月轉移一次新的無菌飼養瓶直到幼蟲發育為僵蟲。

進一步地，步驟S1中所述的無菌卵消毒裝置包括盛放消毒液的液體槽(1)、盛放蟲卵的雙層濾膜網(2)、無菌水噴灑裝置(3)，所述雙層濾膜網(2)通過豎直升降支架設置在所述液體槽(1)上方，所述無菌水噴灑裝置(3)設置在所述雙層濾膜網(2)上方，所述雙層濾膜網向下滑動可完全浸沒在所述液體槽(1)內的消毒液中。

進一步地，步驟S3中的植物塊莖粉為胡蘿卜粉、蕨麻粉一種或兩種組合。

進一步地，步驟S3中的無菌飼料成分配比為每100毫升水中添加瓊脂1-1.5克、胡蘿卜粉3-5克、蕨麻粉2.5-3.5克、珠芽蓼粉1.5-2.5克，調節Ph6.0-6.5。

進一步地，步驟S3中的無菌飼料成分配比為每100毫升水中添加瓊脂1-1.5克、胡蘿卜粉3-5克、蕨麻粉2.5-3.5克，調節Ph6.0-6.5。