[發明專利]一種甘蔗細菌性病害抗性的鑒定方法

有效

• 申請號: 202110696089.X
• 申請日: 2021-06-18
• 公開（公告）號: CN113430244B
• 公開（公告）日: 2023-07-04
• 發明（設計）人: 孔春艷;陸鑫;毛鈞;劉新龍;林秀琴;田春艷;李純佳;徐超華;李旭娟;劉洪博
• 申請（專利權）人: 云南省農業科學院甘蔗研究所
• 主分類號: C12Q1/18
• 分類號: C12Q1/18;A01H4/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明涉及植物抗性檢測領域，特別是涉及一種甘蔗細菌性病害抗性的鑒定方法。本發明提供了一種甘蔗細菌性病害抗性的鑒定方法，包括以下步驟：將甘蔗細菌性病害的病原菌液接種到離體的甘蔗葉片后，對接種所得甘蔗葉片進行培養和抗性鑒定，根據經所述培養后甘蔗葉片上條紋病斑長度，判斷甘蔗對細菌的抗性和發病等級；發病等級和抗性水平劃分標準如下：病斑長度≤5.0cm，發病等級為1級，高抗；5.0cm＜病斑長度≤10.0cm，發病等級為2級，抗病；10.0cm＜病斑長度＜15.0cm，發病等級為3級，感病；病斑長度≥15.0cm，發病等級為4級，高感。本發明所述方法具有操作簡單、不受季節和外界環境的限制、接種鑒定穩定、效率高和周期短的優勢。

技術領域

本發明涉及植物抗性檢測領域，特別是涉及一種甘蔗細菌性病害抗性的鑒定方法。

背景技術

甘蔗白條病是由白條黃單胞桿菌(Xanthomonas?albilineans)引起的，對甘蔗具有毀滅性的細菌性病害，是甘蔗三大細菌性病害之一。白條黃單胞桿菌在2007年被列入《中華人民共和國進境植物檢疫性有害生物名錄》，是我國甘蔗種質進口檢疫的主要對象之一。

白條黃單胞桿菌侵染甘蔗植株后，導致甘蔗生長緩慢，嚴重時造成植株壞死，給甘蔗生產帶來嚴重的損失。近年來，該病害在我國廣西、廣東、云南、海南等蔗區已有報道。甘蔗白條病發病癥狀：可見葉片表面出現與主脈平行的白色至黃色褪綠鉛筆線條紋，條紋顏色隨時間的增長常常變成微紅，邊緣變寬，條紋中帶有許多紅色小點。

甘蔗白條病是一種傳染性較強的細菌性種傳病害，主要通過帶病種苗的運輸進行遠距離傳播、刀具等收獲工具進行傳播、氣流和雨水進行傳播，故開放式活體接種易造成該病的擴散。該病害通常在較長的潛伏期內不表現癥狀或癥狀表現不明顯，一旦遇到適合的環境，便突然爆發，特別是當種植甘蔗品種為不抗病品種時，大面積爆發感染會造成嚴重產量損失。這種潛伏性和突發性特點，給甘蔗白條病的防治和檢疫帶來很大困難。為降低白條病對甘蔗生產的危害，選育并推廣應用抗病品種是甘蔗白條病綠色防控最經濟、有效的措施。

甘蔗白條病傳統的接種鑒定方法主要有剪葉法和截頭法，剪葉法的主要特征是：在甘蔗苗期用消過毒的手術刀沾取白條黃單胞桿菌菌懸液，剪掉植株葉片葉尖1/3部位，每接種1株后，手術刀要重新沾取菌液；截頭法的主要特征是：甘蔗+1葉的葉耳處斬斷頭部，用移液槍取100μL制備好的菌懸液涂抹切口位置；采用剪葉法與截頭法開展甘蔗品種白條病抗性鑒定與評價，雖然操作簡單，但受到甘蔗生長季節限制和外界環境變化的影響較大，接種鑒定不穩定、效率低且周期較長。

發明內容

為了解決上述問題，本發明提供了一種甘蔗細菌性病害抗性的鑒定方法。本發明所述方法操作簡單、不受季節和外界環境的限制，具有接種鑒定穩定、效率高和周期短的優勢。

為了實現上述目的，本發明提供如下技術方案：

本發明提供了一種甘蔗細菌性病害抗性的鑒定方法，包括以下步驟：

將甘蔗細菌性病害的病原菌液接種到離體的甘蔗葉片后，對接種所得甘蔗葉片進行培養和抗性鑒定，根據經所述培養后甘蔗葉片上條紋病斑的長度，判斷甘蔗對細菌的抗性和發病等級；

發病等級和抗性水平劃分標準如下：

病斑長度≤5.0cm，發病等級為1級，高抗；

5.0cm＜病斑長度≤10.0cm，發病等級為2級，抗病；

10.0cm＜病斑長度＜15.0cm，發病等級為3級，感病；

病斑長度≥15.0cm，發病等級為4級，高感。

優選的，所述接種的時間為24h，溫度為28℃；所述培養的溫度為28℃，時間優選為10d。

優選的，所述病原菌液的制備方法，包括以下步驟：