[發明專利]一種甘蔗細菌性病害抗性的鑒定方法

有效

• 申請號: 202110696089.X
• 申請日: 2021-06-18
• 公開（公告）號: CN113430244B
• 公開（公告）日: 2023-07-04
• 發明（設計）人: 孔春艷;陸鑫;毛鈞;劉新龍;林秀琴;田春艷;李純佳;徐超華;李旭娟;劉洪博
• 申請（專利權）人: 云南省農業科學院甘蔗研究所
• 主分類號: C12Q1/18
• 分類號: C12Q1/18;A01H4/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種甘蔗細菌性病害抗性的鑒定方法，其特征在于，包括以下步驟：

將甘蔗細菌性病害的病原菌液接種到離體的甘蔗葉片后，對接種所得甘蔗葉片進行培養和抗性鑒定，根據經所述培養后甘蔗葉片上條紋病斑的長度，判斷甘蔗對細菌的抗性和發病等級；所述接種的時間為24h，溫度為28℃；所述培養的溫度為28℃，時間為10d；

發病等級和抗性水平劃分標準如下：

病斑長度≤5.0cm，發病等級為1級，高抗；

5.0cm＜病斑長度≤10.0cm，發病等級為2級，抗病；

10.0cm＜病斑長度＜15.0cm，發病等級為3級，感病；

病斑長度≥15.0cm，發病等級為4級，高感。

2.根據權利要求1所述鑒定方法，其特征在于，所述病原菌液的制備方法，包括以下步驟：

(1)將甘蔗細菌性病害的病原菌置于XAL液體培養基中活化培養，得活化菌液；

(2)將活化菌液置于XAS固體培養基中培養，得甘蔗細菌性病害的病原菌單菌落；

(3)挑取病原菌單菌落，接種到XAS固體培養基中培養，得純化細菌；

(4)將純化細菌的單菌落置于XAL液體培養基中培養，用XAL液體培養基將其稀釋，得所述病原菌液。

3.根據權利要求2所述鑒定方法，其特征在于，所述XAL液體培養基包括以下濃度的組分：10g/L的蔗糖、5g/L的細菌級蛋白胨、5g/L的酵母提取物、0.5g/L的磷酸氫二鉀、0.25g/L的七水合硫酸鎂、0.05g/L的亞硫酸鈉、5g/L的溴化鉀、0.01g/L的苯菌靈、25mg/L頭孢氨芐、30mg/L的新生霉素、50mg/L的春日霉素和100mg/L的放線菌酮。

4.根據權利要求2所述鑒定方法，其特征在于，所述XAS固體培養基包括以下濃度的組分：10g/L的蔗糖、5g/L的細菌級蛋白胨、5g/L的酵母提取物、0.5g/L的磷酸氫二鉀、0.25g/L的七水合硫酸鎂、0.05g/L的亞硫酸鈉、5g/L的溴化鉀、0.01g/L的苯菌靈、15g/L的瓊脂粉、25mg/L頭孢氨芐、30mg/L的新生霉素、50mg/L的春日霉素和100mg/L的放線菌酮。

5.根據權利要求2所述鑒定方法，其特征在于，步驟(1)所述活化培養的溫度為28～32℃，轉速為200rpm，時間為18～24h。

6.根據權利要求2所述鑒定方法，其特征在于，步驟(2)和步驟(3)所述培養的溫度均為28～32℃，時間均為4～5d。

7.根據權利要求2所述鑒定方法，其特征在于，步驟(4)所述培養的溫度為28～32℃，轉速為200rpm，時間為36～48h。

8.根據權利要求1～7任一項所述鑒定方法，其特征在于，所述病原菌液的濃度為1×10⁸cfu/mL。

9.根據權利要求1所述鑒定方法，其特征在于，所述甘蔗葉片的長度為20cm。