[發(fā)明專(zhuān)利]一種新冠病毒疫苗的表達(dá)載體及其構(gòu)建方法、應(yīng)用和疫苗

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110673867.3
• 申請(qǐng)日: 2021-06-17
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN113186223A
• 公開(kāi)（公告）日: 2021-07-30
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 蘇小平;李銳;李偉迎;張齊
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 浙江格源致臻生物醫(yī)藥科技有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): C12N15/85
• 分類(lèi)號(hào): C12N15/85;C12N15/50;C12N15/66;C07K14/165;A61K39/215;A61P31/14
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1.一種新冠病毒疫苗的表達(dá)載體，其特征在于，所述表達(dá)載體能夠同時(shí)表達(dá)新冠病毒的S蛋白和NP蛋白。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種新冠病毒疫苗的表達(dá)載體，其特征在于，所述表達(dá)載體所表達(dá)的蛋白的氨基酸序列如序列表SEQ ID NO:1所示。

3.一種如權(quán)利要求1~2中任一項(xiàng)所述新冠病毒疫苗的表達(dá)載體的構(gòu)建方法，其特征在于，包括以下步驟：

將表達(dá)新冠病毒S蛋白與NP蛋白的核苷酸序列使用2A肽進(jìn)行連接，合成融合基因；

在融合基因的兩端分別包含兩個(gè)酶切位點(diǎn)，并裝載到質(zhì)粒，得到重組質(zhì)粒；

對(duì)重組質(zhì)粒進(jìn)行雙酶切，切膠回收目的基因片段；

對(duì)原始的質(zhì)粒進(jìn)行雙酶切，切膠回收載體片段；

將目的基因片段和載體片段進(jìn)行連接，得到所述表達(dá)載體。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種新冠病毒疫苗的表達(dá)載體的構(gòu)建方法，其特征在于，2A肽的氨基酸序列如序列表SEQ ID NO:2所示。

5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種新冠病毒疫苗的表達(dá)載體的構(gòu)建方法，其特征在于，兩個(gè)酶切位點(diǎn)分別為XbaI和SalI酶切位點(diǎn)。

6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種新冠病毒疫苗的表達(dá)載體的構(gòu)建方法，其特征在于，兩個(gè)酶切位點(diǎn)分別為NheI和HindIII酶切位點(diǎn)。

7.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種新冠病毒疫苗的表達(dá)載體的構(gòu)建方法，其特征在于，步驟中，使用DNA連接酶將目的基因片段和載體片段進(jìn)行連接。

8.一種采用如權(quán)利要求3~7中任一項(xiàng)所述構(gòu)建方法得到的表達(dá)載體。

9.一種如權(quán)利要求1~2、8中任一項(xiàng)所述表達(dá)載體在制備治療和/或預(yù)防新冠病毒的藥物中的應(yīng)用。

10.一種疫苗，其特征在于，所述疫苗由如權(quán)利要求1~2、8中任一項(xiàng)所述表達(dá)載體制得。