[發(fā)明專利]一種線粒體靶向的谷胱甘肽衍生物納米制劑及應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202110673264.3
• 申請日: 2021-06-17
• 公開（公告）號: CN113456825B
• 公開（公告）日: 2023-07-11
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 林森;黃寶珊;南開輝;李青;金佳惠;譚婧陽
• 申請（專利權(quán)）人: 溫州醫(yī)科大學(xué);中國科學(xué)院大學(xué)溫州研究院(溫州生物材料與工程研究所)
• 主分類號: A61K47/34
• 分類號: A61K47/34;A61K47/18;A61K9/08;A61K47/36;A61K47/26;A61P27/06;B82Y5/00;B82Y40/00
• 代理公司: 溫州名創(chuàng)知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 33258
• 代理人: 朱海曉

本發(fā)明屬于藥物制劑領(lǐng)域，具體涉及一種線粒體靶向的谷胱甘肽衍生物納米制劑及應(yīng)用。本發(fā)明提供的谷胱甘肽衍生物納米制劑可形成線粒體靶向分布，其能夠很好地保護(hù)過氧化氫誘導(dǎo)(氧化損傷)的細(xì)胞凋亡，具有較強(qiáng)的線粒體保護(hù)效果，在青光眼實驗動物模型上可發(fā)現(xiàn)其具有在體眼壓控制效果。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于藥物制劑領(lǐng)域，具體涉及一種線粒體靶向的谷胱甘肽衍生物納米制劑及應(yīng)用。

背景技術(shù)

谷胱甘肽（GSH）廣泛存在于各種動、植物細(xì)胞中可作為還原劑，參與生物體內(nèi)氧化、還原狀態(tài)的調(diào)節(jié)，是維護(hù)胞內(nèi)氧化、還原平衡，促進(jìn)生物大分子（脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、DNA等）氧化損傷修復(fù)的關(guān)鍵成分。線粒體是細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生自由基的主要細(xì)胞器，也是最容易受到氧化損傷的細(xì)胞器。小梁細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能異常，導(dǎo)致房水排出受限，形成高眼壓是青光眼的主要病理特征。高眼壓作為一種逆境，容易給小梁網(wǎng)細(xì)胞等前房周圍組織細(xì)胞線粒體內(nèi)自由基累積，從而促進(jìn)細(xì)胞器結(jié)構(gòu)和功能損害和細(xì)胞凋亡，并進(jìn)一步帶來難以修復(fù)的器質(zhì)性改變。因此線粒體靶向的抗氧化物遞送，可從源頭上抑制病理條件下自由基失衡，達(dá)到治療效果。

作為一種青光眼用滴眼液制劑，藥物需要跨越角膜屏障到達(dá)前房。在藥物的遞送過程中，眼表靜態(tài)（角膜等組織屏障）和動態(tài)屏障（眨眼等生理作用）作用使藥物生物利用度低，是普遍存在的關(guān)鍵問題。同時，作為一種線粒體靶向藥物，在線粒體靶向遞送的過程中面臨細(xì)胞膜屏障、線粒體膜屏障、和胞內(nèi)代謝屏障等，使效率降低。由于尺寸效應(yīng)，納米粒子通過內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞，用它包載能夠顯著提高外源抗氧化物跨膜轉(zhuǎn)運的效率和對代謝酶系的耐受性。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是為了克服現(xiàn)有技術(shù)存在的缺點和不足，而提供一種線粒體靶向的谷胱甘肽衍生物納米制劑及應(yīng)用。

本發(fā)明所采取的技術(shù)方案如下：一種線粒體靶向的谷胱甘肽衍生物納米制劑，其制備過程包括以下步驟：

（1）將氧化型谷胱甘肽與過量的具有羧基端的三苯基膦化合物反應(yīng)，形成雙三苯基膦化合物修飾的谷胱甘肽，然后在二硫蘇糖醇作用下分解形成單三苯基膦化合物修飾的谷胱甘肽，分離純化后得到純的TPP-GSH；

（2）通過氨基PEG誘導(dǎo)的谷氨酸芐酯-N-羰基環(huán)內(nèi)酸酐，形成PEG和聚谷氨酸芐酯的嵌段共聚物，該共聚物在堿性條件下水解，去除聚谷氨酸芐酯端的芐基，形成PEG-PGA的嵌段共聚物；

（3）將PEG-PGA的嵌段共聚物溶解后，與TPP-GSH溶液混合均勻，在攪拌下滴加到殼聚糖或殼寡糖的溶液中，劇烈攪拌下得到谷胱甘肽衍生物納米制劑。

步驟（1）中，氧化型谷胱甘肽與過量的具有羧基端的三苯基膦化合物在催化劑下進(jìn)行，所述催化劑為EDC或NHS。

步驟（1）中，所述單三苯基膦化合物修飾的谷胱甘肽通過透析分離純化。

步驟（2）中，具體過程如下：谷氨酸芐酯-N-羰基環(huán)內(nèi)酸酐溶于氮氮二甲基甲酰胺中，并與氨基PEG混合在氮氣保護(hù)下反應(yīng)得到PEG和聚谷氨酸芐酯的嵌段共聚物，并在NaOH的作用下去除芐基，形成PEG-PGA嵌段共聚物。

步驟（3）中，劇烈攪拌下得到谷胱甘肽衍生物納米制劑后，在14000rpm、4℃、5min的條件下離心2次，透析去除殘余的未包載的谷胱甘肽衍生物和溶劑。

步驟（3）中，殼聚糖或殼寡糖的溶液具體選用1mg/mL的殼寡糖溶液，PEG-PGA的嵌段共聚物的濃度為0.01-1mg/mL。

如上所述的線粒體靶向的谷胱甘肽衍生物納米制劑在制備治療氧化應(yīng)激相關(guān)疾病的藥物的應(yīng)用。

一種用于治療氧化應(yīng)激相關(guān)的眼表或眼內(nèi)疾病的滴眼液，其包含如上所述的線粒體靶向的谷胱甘肽衍生物納米制劑。