[發明專利]一種VAV2基因缺失的腫瘤細胞系

有效

• 申請號: 202110668444.2
• 申請日: 2021-06-16
• 公開（公告）號: CN113322237B
• 公開（公告）日: 2022-05-13
• 發明（設計）人: 林東昕;吳晨;苗傳望;劉偉玲;席奕軼;劉亞宸;林皚;仲策;張少森
• 申請（專利權）人: 中國醫學科學院腫瘤醫院
• 主分類號: C12N5/10
• 分類號: C12N5/10;C12N15/85;A01K67/027;C12Q1/02;C12R1/91
• 代理公司: 北京預立生科知識產權代理有限公司 11736
• 代理人: 朱萍;孟祥斌

1.一種食管癌細胞系，所述食管癌細胞系命名為VAV2基因缺失小鼠食管癌細胞系NCCE2，于2021年3月3日由中國典型培養物保藏中心保藏，保藏號為CCTCC NO：C202140。

2.一種構建VAV2基因缺失的食管癌細胞系的方法，所述方法包括如下步驟：

1）利用Cas9/RNA system gene targeting技術，針對mouse VAV2基因設計gRNA，構建包含所述gRNA的載體；

2）使用1）中構建的載體敲除小鼠的VAV2基因，獲得VAV2基因中缺失如SEQ ID NO:1所示序列的小鼠；

3）誘導2）獲得的小鼠成瘤；

4）取3）的腫瘤組織，繼續培養，獲得食管癌細胞系。

3.如權利要求2所述的方法，其特征在于，所述小鼠是C57BL/6小鼠。

4.如權利要求2所述的方法，其特征在于，所述誘導包括使用致癌劑對小鼠進行處理。

5.如權利要求4所述的方法，其特征在于，所述處理是飼喂致癌劑。

6.如權利要求5所述的方法，其特征在于，所述致癌劑是4NQO。

7.如權利要求2所述的方法，其特征在于，所述腫瘤組織是食管處的新生腫瘤。

8.如權利要求2所述的方法，其特征在于，所述食管癌細胞系是經過實驗驗證的細胞系。

9.如權利要求8所述的方法，其特征在于，所述實驗驗證包括增殖能力檢測、克隆能力檢測、細胞遷移能力檢測。

10.權利要求2所述的VAV2基因中缺失如SEQ ID NO:1所示序列的小鼠在制備VAV2缺失的細胞系中的應用。

11.權利要求1所述的細胞系的用途，其特征在于，所述用途包括以下任意一種：篩選和/或評價/制備腫瘤治療藥物，開發腫瘤藥物靶點，制備腫瘤診斷試劑，開發腫瘤治療新技術，開發檢測腫瘤相關生物工程產品。