[發明專利]一種利用葡糖酸醋桿菌制備酸香型煙草提取物的方法

有效

• 申請號: 202110666710.8
• 申請日: 2021-06-16
• 公開（公告）號: CN113519882B
• 公開（公告）日: 2022-10-25
• 發明（設計）人: 馮穎杰;張婷婷;彭桂新;張展;楊宗燦;劉文召;席高磊;胡少東;楚文娟;馬勝濤
• 申請（專利權）人: 河南中煙工業有限責任公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A24B3/12;A24B15/26;A24B15/18;C11B9/00
• 代理公司: 北京維澳專利代理有限公司 11252
• 代理人: 曾晨

本發明公開了一種利用葡糖酸醋桿菌制備酸香型煙草提取物的方法，包括：配制含有葡萄糖、蛋白胨、酵母粉和一水合檸檬酸的水溶液，接種保藏編號為CGMCC NO.21544的葡糖酸醋桿菌ZT?01，制得種子液；將煙末與提取液混合，回流提取，過濾后取濾液進行真空旋蒸處理，滅菌后得到煙草浸提液；將種子液和煙草浸提液先攪拌發酵再靜置發酵，得到發酵煙草浸提液；離心取上清液分離純化，收集洗脫組分，濃縮得到濃縮液；在濃縮液中加入無水乙醇，離心取上清液，得到醇沉物；在醇沉物中加入1,2?丙二醇。本公開的利用葡糖酸醋桿菌制備酸香型煙草提取物的方法制得的煙草提取物具有水果的香氣，發酵產生的酸性香味成分在一定程度上可以緩解煙堿帶來的刺激感。

技術領域

本發明涉及煙草提取領域，更具體地，涉及一種利用葡糖酸醋桿菌制備酸香型煙草提取物的方法。

背景技術

煙草提取物是卷煙加工中極為重要的煙用香料，可賦予卷煙更為自然、飽滿的香氣。煙草提取物一般采用有機溶劑或水從煙草中提取、純化、濃縮而成。傳統方法制備的煙草提取物的香味特征取決于煙葉原料的種類。然而，面對多樣化的卷煙產品開發要求，需要開發出更多種風格類型的煙草提取物。

煙草提取物在提取過程中會存在很多大分子物質如蛋白、淀粉、果膠等，影響煙草提取物的品質，后期需要使用分離技術去除。而利用微生物發酵法可以有效降解大分子物質，并轉化為小分子糖、氨基酸以及新型的香味成分，賦予煙草提取物新的風格特征。

因此，如何提供一種可制備具有特殊香味的煙草提取物的方法成為本領域亟需解決的技術難題。

發明內容

本發明的一個目的是提供一種可制備具有特殊香味的煙草提取物的方法的新技術方案。

根據本發明的第一方面，提供了一種利用葡糖酸醋桿菌制備酸香型煙草提取物的方法。

該利用葡糖酸醋桿菌制備酸香型煙草提取物的方法包括如下步驟：

步驟(1)：配制含有葡萄糖、蛋白胨、酵母粉和一水合檸檬酸的水溶液，調節pH并滅菌后，接種保藏編號為CGMCC NO.21544的葡糖酸醋桿菌(Gluconacetobacter sp.)ZT-01，恒溫震蕩培養一段時間，制得種子液；

步驟(2)：將煙末與提取液按照質量體積比1:(2-20)混合，30℃-120℃下回流提取0.5h-5h，過濾后取濾液進行真空旋蒸處理，滅菌后得到煙草浸提液，其中，煙末的質量的單位為g，提取液的體積的單位為mL，提取液包括乙醇和水，且提取液中乙醇和水的體積比為(1-10):20；

步驟(3)：將種子液和煙草浸提液按照體積比1:(10-1000)混合，在溫度25-40℃、50-300r/min下先攪拌發酵12-48h再靜置發酵12-72h，得到發酵煙草浸提液；

步驟(4)：過濾除去發酵煙草浸提液中的固態細菌纖維素，隨后離心取上清液，將上清液分離純化，采用不同純度的乙醇梯度洗脫，收集洗脫組分，濃縮至密度為1.145-1.155g/mL，得到濃縮液；

步驟(5)：在濃縮液中加入等體積的無水乙醇，低溫靜置一段時間后，離心取上清液，得到醇沉物；

步驟(6)：在醇沉物中加入體積為醇沉物體積的1％-50％的1,2-丙二醇，即得到煙草提取物。

可選的，所述步驟(1)具體如下：

配制含有20g/L葡萄糖、5g/L蛋白胨、5g/L酵母粉、1g/L一水合檸檬酸的水溶液，調節pH至4.8-5，于121℃滅菌15min，接種保藏編號為CGMCC NO.21544的葡糖酸醋桿菌ZT-01后于25-40℃，100-200r/min的條件下恒溫震蕩培養12-48h，制得種子液。

可選的，所述步驟(1)中的培養條件如下：

溫度為30℃，轉速為150r/min，時間為24h。